補(bǔ)陽(yáng)還五湯防治周圍神經(jīng)損傷導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)障礙的機(jī)理研究.pdf

1、目的：
　　通過觀察補(bǔ)陽(yáng)還五湯對(duì)大鼠腓總神經(jīng)損傷后腓總神經(jīng)及脛前肌形態(tài)與功能、神經(jīng)生長(zhǎng)因子（nerve growth factor，NGF）及mRNA表達(dá)的影響，探討補(bǔ)陽(yáng)還五湯治療周圍神經(jīng)損傷導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)障礙的部分機(jī)理，為臨床應(yīng)用和進(jìn)一步研究補(bǔ)陽(yáng)還五湯治療周圍神經(jīng)損傷導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)障礙提供客觀的理論依據(jù)。
　　方法：
　　1.補(bǔ)陽(yáng)還五湯治療周圍神經(jīng)損傷導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)障礙的理論探討
　　收集、整理中醫(yī)學(xué)有關(guān)痿證及西醫(yī)學(xué)對(duì)周圍神經(jīng)損

2、傷的文獻(xiàn)研究，探討防治周圍神經(jīng)損傷導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)障礙的研究概況并總結(jié)近年來(lái)有關(guān)補(bǔ)陽(yáng)還五湯組方、配伍、單味藥及復(fù)方的現(xiàn)代藥理研究等文獻(xiàn)資料。
　　2.補(bǔ)陽(yáng)還五湯治療腓總神經(jīng)損傷導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)障礙的實(shí)驗(yàn)研究
　　SPF級(jí)雄性大鼠48只，隨機(jī)分為假手術(shù)組、彌可保組（劑量為625mg/g）、模型組、補(bǔ)陽(yáng)還五湯（Buyang huanwu decoction，BYHWD）高、中、低劑量組（劑量分別為25.92mg/g、12.96mg/g、6.48

3、mg/g生藥）。建立大鼠腓總神經(jīng)夾傷模型，每日灌胃給藥。21d后測(cè)量足趾寬度，記錄展趾功能;進(jìn)行肌電圖檢測(cè)，測(cè)量肌電位衰減率;檢測(cè)脛前肌的濕重比;脛前肌HE染色，測(cè)定脛前肌肌纖維橫截面積;運(yùn)用透射電鏡組織學(xué)技術(shù)觀察得出髓鞘形態(tài)與厚度;運(yùn)用免疫組化法檢測(cè)大鼠NGF的分泌情況;PCR檢測(cè)腓總神經(jīng)中神經(jīng)生長(zhǎng)因子mRNA的表達(dá)，以此觀察補(bǔ)陽(yáng)還五湯給藥后大鼠腓總神經(jīng)再生與功能恢復(fù)情況。
　　結(jié)果：
　　1.周圍神經(jīng)損傷導(dǎo)致的運(yùn)動(dòng)障礙相

4、當(dāng)于祖國(guó)醫(yī)學(xué)的“痿證”范疇。發(fā)病的主要病理機(jī)制之一為元?dú)獯髠⒀}不通。病性為本虛標(biāo)實(shí)。元?dú)獯髠麨楸?，血脈瘀阻為標(biāo)。主要治法為補(bǔ)氣活血。補(bǔ)陽(yáng)還五湯作為補(bǔ)氣活血法的代表方，治療本病，切合病機(jī)。
　　2.展趾功能:術(shù)后第2d忠側(cè)出現(xiàn)足趾蜷縮和跛行。7d后BYHWD中、高劑量組和彌可保組足趾逐漸伸展，而模型組恢復(fù)則很慢。14d后情況繼續(xù)好轉(zhuǎn)。21d后各組足趾明顯伸展，步態(tài)基本恢復(fù)正常。但是除假手術(shù)組外，其余各組患側(cè)均出現(xiàn)不同程度的運(yùn)動(dòng)障

5、礙。展趾功能結(jié)果顯示，與假手術(shù)組比，模型組差異顯著(P＜0.01)。BYHWD高劑量組、彌可保組與模型組相比差異顯著（P＜0.01或P＜0.05）。BYHWD各組與彌可保組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　3.重復(fù)神經(jīng)電刺激檢測(cè)衰減反應(yīng):假手術(shù)組除外，其余五組組大鼠RNS均出現(xiàn)不同程度的衰減，差異顯著（P＜0.01）。BYHWD高劑量、彌可保組與模型組比較差異顯著(P＜0.01)。BYHWD高劑量與彌可保組相比不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)差

6、異。
　　4.脛前肌濕重比:與假手術(shù)組相比，各組大鼠患側(cè)脛前肌的濕重比都呈現(xiàn)不同程度的降低(P＜0.01或P＜0.05)。與模型組相比，BYHWD高劑量、彌可保組均有顯著增高（P＜0.05)，而彌可保組與BYHWD組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　5.脛前肌橫截面積:假手術(shù)組脛前肌橫截面形態(tài)較規(guī)則，結(jié)締組織很少。與假手術(shù)組相比，模型組肌纖維結(jié)構(gòu)紊亂、細(xì)胞間隙增寬、結(jié)締組織增生、肌纖維萎縮變性明顯。BYHWD各組和彌可保

7、組細(xì)胞間隙增寬，肌纖維輕度萎縮變性，但形態(tài)較規(guī)則，結(jié)構(gòu)尚清晰、染色較均一，結(jié)締組織增生不明顯肌纖維橫截面積統(tǒng)計(jì)分析提示:其余五組與假手術(shù)組相比差異顯著(P＜0.05)。BYHWD各組與彌可保組相比無(wú)明顯差異（P＞0.05）。
　　6.腓總神經(jīng)電鏡形態(tài)學(xué)觀察:假手術(shù)組軸突內(nèi)在軸突內(nèi)可見到橫斷的微管、神經(jīng)絲及軸系膜。部分髓鞘神經(jīng)橫切面形態(tài)規(guī)則，髓鞘板層結(jié)構(gòu)排列整齊、均勻，無(wú)離散現(xiàn)象。BYHWD和彌可保組髓鞘厚度改變不明顯，只有少量變性

8、的神經(jīng)纖維髓鞘板層離散。BYHWD中、低劑量組髓鞘厚度進(jìn)一步變薄、板層離散情況更一步加重。模型組髓鞘厚度進(jìn)一步減薄，部分髓鞘板層離散非常嚴(yán)重，形成大量髓鞘球。各組大鼠脫髓鞘厚度統(tǒng)計(jì)結(jié)果可見:其它五組與假手術(shù)組相比差異顯著（P＜0.05），與模型組相比，BYHWD各組與彌可保組差異顯著（P＜0.05）。與彌可保組相比，BYHWD高劑量組差異顯著(P＜0.05)。
　　7.NGF蛋白表達(dá):假手術(shù)組、BYHWD各組和彌可保組可見較多NG

9、F免疫反應(yīng)陽(yáng)性顆粒，呈淺棕色。模型組大鼠NGF陽(yáng)性顆粒數(shù)目減少，著色淺淡。假手術(shù)組與模型組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。BYHWD各組彌可保組與模型組比差異顯著(P＜0.01或P＜0.05)。
　　8.NGF-mRNA的表達(dá):6組的NGF-mRNA基因相對(duì)表達(dá)量比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，假手術(shù)組、彌可保組與BYHWD高、中、低劑量組NGF-mRNA基因相對(duì)表達(dá)量明顯增高，分別是模型組的4.79倍、2.16倍、3

10、.41倍、1.83倍、1.31倍;其中BYHWD中劑量及高劑量組、彌可保組NGF-mRNA相對(duì)表達(dá)量明顯強(qiáng)于模型組(P＜0.05)，BYHWD高劑量組NGF-mRNA相對(duì)表達(dá)量明顯強(qiáng)于彌可保組(P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.補(bǔ)陽(yáng)還五湯能夠有效促進(jìn)大鼠夾傷神經(jīng)及其靶器官骨骼肌形態(tài)與功能恢復(fù)，對(duì)大鼠周圍神經(jīng)損傷導(dǎo)致的運(yùn)動(dòng)障礙有較好的防治作用。
　　2.補(bǔ)陽(yáng)還五湯對(duì)周圍神經(jīng)再生的保護(hù)作用與它對(duì)NGF蛋白和腓總神經(jīng)中N