鍉針點(diǎn)按“大椎”穴對大鼠頸椎病模型軟骨細(xì)胞炎性因子及MKK3-6-p38MAPK通路的影響.pdf

1、目的:觀察鍉針點(diǎn)按“大椎”穴對大鼠頸椎病模型軟骨細(xì)胞炎性因子及對MKK3/6-p38MAPK信號通路上P-MKK3/6、P-p38MAPK表達(dá)的影響。
　　方法:40只SD大鼠（雌雄各半）隨機(jī)分成假手術(shù)組10只，造模組30只，其中假手術(shù)組僅將頸后部皮膚切開后縫合，造模組采用動靜力失衡大鼠頸椎間盤退變模型造模。造模3個(gè)月后用天狼星紅染色法確定造模成功后，將造模組大鼠隨機(jī)分為模型對照組（模型組）、模型給藥組（給藥組）、模型點(diǎn)按組（點(diǎn)按

2、組）3組，每組各8只。點(diǎn)按組把Tekscan公司研發(fā)的FlexiForce ELF System超薄型壓力感測片接頭放置在定位好的大鼠“大椎”穴上，由專業(yè)人員1人手持鍉針，如握筆姿勢，同時(shí)將鍉針的針頭部位對準(zhǔn)壓力感測片的接頭進(jìn)行點(diǎn)按，手法的力量由FlexiForce ELF System測量，刺激的力量控制在（4±0.5）N范圍，點(diǎn)按時(shí)鍉針在穴位上停留約5s左右后，慢慢地抬起手和鍉針間歇約3s后再如前進(jìn)行點(diǎn)按，如此反復(fù)操作20分鐘，每天

3、1次，連續(xù)14天一療程，共2個(gè)療程，一次療程結(jié)束后間隔2天后再做下一療程;給藥組予美洛昔康藥物灌胃治療，每日1次，治療時(shí)間及療程同點(diǎn)按組;假手術(shù)組和模型組只是固定不做其他處理，治療時(shí)間及療程同點(diǎn)按組。療程結(jié)束后處死各組大鼠，分別采用免疫組化和Western blot半定量檢測法檢測各組大鼠椎間盤軟骨細(xì)胞內(nèi)的TNF-α、 IL-1β及頸椎間盤軟骨組織中P-MKK3/6、P-p38MAPK的蛋白含量。
　　結(jié)果:(1)天狼星紅染色:與

4、假手術(shù)組比較，造模組Ⅰ型膠原增多，Ⅱ型膠原減少，椎間盤的膠原系統(tǒng)Ⅰ型膠原和Ⅱ型膠原比例出現(xiàn)明顯變化，提示頸椎間盤退變，該模型復(fù)制成功。
　　(2)免疫組織化學(xué)檢測:與假手術(shù)組比較，模型組中TNF-α、 IL-1β陽性表達(dá)量顯著增多，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);與模型組比較，點(diǎn)按組、給藥組中TNF-α、IL-1β的蛋白表達(dá)量均明顯減少，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　(3) Western Blot檢測:與假

5、手術(shù)組比較，模型組中P-MKK3/6、P-p38MAPK蛋白陽性表達(dá)量明顯增加，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);與模型組比較，點(diǎn)按組、給藥組P-MKK3/6、P-p38MAPK蛋白表達(dá)量明顯下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:(1)鍉針點(diǎn)按“大椎”能降低大鼠退變頸椎間盤軟骨細(xì)胞中TNF-α、IL-1β蛋白表達(dá)量。
　　(2)鍉針點(diǎn)按“大椎”可下調(diào)退變頸椎間盤軟骨組織中P-MKK3/6、P-p38MAPK