MET、EGFR在不同基因類型乳腺癌中的表達及臨床意義.pdf

1、研究背景：
　　乳腺癌是當前嚴重危害女性身心健康的惡性腫瘤之一，其發(fā)病機制復雜，影響因素較多。隨著人們生活方式、環(huán)境等改變，我國乳腺癌的發(fā)病率顯著增加，并呈年輕化的趨勢。由于乳腺癌的異質(zhì)性，病人在治療反應、預后等方面存在明顯差異。伴隨著分子生物學的發(fā)展，人們將這種差異歸因于基因水平的差異。近年來尋找新的分子標記物為乳腺癌病人提供更好的個體化治療是目前研究的熱點。
　　MET（Mesenchymal-epithelialtra

2、nsition）基因位于7q31，屬于酪氨酸激酶家族成員，其配體為HGF(Hepatocytegrowthfactor)。MET與配體結合后引起受體激酶區(qū)域的二聚化和胞質(zhì)的自動磷酸化，導致細胞內(nèi)信號通路的激活。MET信號通路在維持正常組織的生理功能中發(fā)揮重要的作用，包括胚胎的發(fā)育、血管的形成、細胞的生長和傷口的愈合。MET基因的異常還與腫瘤的發(fā)生有關，如乳腺癌、非小細胞肺癌、胃癌、食管癌、子宮內(nèi)膜癌、肝癌、結直腸癌和腎癌。在癌的發(fā)生發(fā)展

3、中HGF/MET的激活可以導致侵襲、增值、血管新生。異常HGF/MET信號通路的激活與腫瘤的惡性程度和預后不良密切相關。研究表明MET通過與其他通路間的相互作用在獲得性耐藥中發(fā)揮著關鍵作用，如酪氨酸激酶家族特別是EGFR。
　　表皮生長因子受體EGFR（Epidermalgrowthfactorreceptor）是原癌基因c-erbB-1的產(chǎn)物，位于7p11-13,屬于表皮生長因子受體家族的四個成員之一。由胞內(nèi)區(qū)（酪氨酸激酶區(qū)域）

4、，短的跨膜區(qū)、膜旁區(qū)和酪氨酸激酶配體活躍的胞外區(qū)域（配體結合域）組成。EGFR能夠被大量的生長因子配體激活包括表皮生長因子（EGF）和轉(zhuǎn)換生長因子α（TGF-α）。EGFR與配體的結合導致酪氨酸激酶殘基的磷酸化，引起下游信號的級聯(lián)反應。表皮生長因子酪氨酸殘基配體依賴區(qū)域的激活作為信號感應器和調(diào)節(jié)蛋白的結合位點來調(diào)節(jié)細胞內(nèi)基質(zhì)的信號流程。磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）和AKT通路，RAS/MAPK通路是主要的信號機制，其主要的生物作用包括細

5、胞增殖，生存，血管生成和抑制凋亡研究證實，在許多的惡性腫瘤中出現(xiàn)EGFR的過表達現(xiàn)象。
　　在胰腺癌，非小細胞肺癌的研究中發(fā)現(xiàn)MET與EGFR在通路上存在復雜的交互作用，共同參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、和轉(zhuǎn)移，但是二者在乳腺癌中的表達情況目前的文獻中報道甚少。本實驗用免疫組化IHC（Immunohistochemistry）和熒光原位雜交FISH（Fluorescenceinsituhybridization）方法檢測不同基因類型的乳腺

6、癌組織中MET基因、EGFR基因蛋白表達和基因擴增的情況。初步探討二者與乳腺癌基因分型、臨床病理指標的關系以及二者之間的相關性。
　　材料與方法：
　　研究對象：
　　收集鄭州大學第一附屬醫(yī)院病理科2011年至2015年經(jīng)外科手術切除，病理診斷為乳腺癌的病例100例。所有病例術前均未接受放療、化療、內(nèi)分泌治療。手術方式包括乳腺癌根治術，改良根治術，保乳+腋下淋巴結清掃。根據(jù)病理報告中ER、PR、HER-2、Ki-67的

7、表達情況對乳腺癌病例進行分型。
　　方法：
　　采用免疫組織化學鏈霉親和素-過氧化物酶法（SP法）和熒光原位雜交（FISH法）檢測MET和EGFR在乳腺癌組織中的表達情況。統(tǒng)計分析運用SPSS21.0統(tǒng)計軟件處理，用非參數(shù)檢驗中Kruskal-WallisH檢驗（秩和檢驗）分析乳腺癌各型中MET和EGFR的表達情況，用Spearman方法分析MET基因和EGFR基因之間的相關性，Mann-whitneyU秩和檢驗分析MET、

8、EGFR與臨床病理指標的關系，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結果：
　　1、MET蛋白在乳腺癌中陽性率為20％。不同基因類型中的陽性率分別為：管腔A型13%，管腔B型0%，基底細胞樣型52%，HER-2過表達型10%。MET蛋白的表達與基因分型有關P＜0.05，主要表達在基底細胞樣型乳腺中。
　　2、EGFR蛋白在乳腺癌中的陽性率為17%。不同基因類型中的陽性率分別為：管腔A型0%，管腔B型中陽性率為0%，基底

9、細胞樣型63%，在HER-2過表達型0%。EGFR蛋白的表達與基因分型有關（P＜0.05），主要表達在基底細胞樣型乳腺癌。
　　3、MET蛋白和EGFR蛋白的表達呈正相關r=0.572，P＜0.05
　　4、在乳腺癌中MET基因擴增15例，陽性率為15%。其中在HER-2過表達型和管腔B型乳腺癌未見基因擴增；在管腔A型中擴增2例（陽性率5%）；在基底細胞樣型中擴增13例（陽性率48%），MET基因的擴增與基因分型有關（P＜0

10、.05），主要在基底細胞樣型乳腺癌中。
　　5、EGFR在乳腺癌中擴增14例，陽性率為14%。其中在管腔A型、HER-2過表達型、管腔B型中未見擴增。在基底細胞樣型中擴增14例（陽性率為52%），EGFR基因擴增與基因分型有關（P＜0.05），主要在基底細胞樣型乳腺癌中。
　　6、MET基因的擴增與EGFR基因的擴增具有相關性，r=0.686，P＜0.05。
　　7、MET基因的擴增與MET蛋白表達正相關，r=0.70

11、1，P＜0.05。
　　8、EGFR基因的擴增與EGFR蛋白表達正相關，r=0.928，P＜0.05。
　　9、MET基因與患者的年齡、絕經(jīng)情況、腫瘤的大小、淋巴結是否轉(zhuǎn)移、組織學分級無關P＞0.05，與TNM分期有關P＜0.05。
　　10、EGFR基因與患者的年齡、絕經(jīng)情況、腫瘤的大小、組織學分級無關P＞0.05，與淋巴結轉(zhuǎn)移、TNM分期有關P＜0.05。
　　結論：
　　MET基因和EGFR基因的表達