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文檔簡介
1、目的:
觀察健脾化瘀法中藥對人類肝癌細胞株SMMC-7721增殖、侵襲遷移能力的影響。
方法:
根據血清藥理學研究原理,用經健脾化瘀法中藥水煎劑灌胃的Wistar大鼠的含藥血清以及未經中藥灌胃的正??瞻籽?,對人類肝癌細胞株SMMC-7721進行體外培養(yǎng),進行細胞實驗。實驗中對照組給予含有10%正常血清細胞培養(yǎng)基,實驗組給予含有10%、20%含藥血清細胞培養(yǎng)基。
?、偻ㄟ^CCK-8法比色實驗分別對培
2、養(yǎng)48h、72h后的對照組和實驗組細胞進行檢測,計算其吸光度OD值以及細胞增殖抑制率,三組間均數分析使用單因素方差分析,兩兩組間分析運用LSD分析,兩組相關數據間比較使用配對樣本t檢驗方法,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義;觀察健脾化瘀法中藥對肝癌細胞SMMC-7721的增殖抑制作用。
?、谕ㄟ^細胞劃痕實驗測量并計算24h、48h后的對照組和實驗組細胞的細胞遷移速率、遷移抑制率,三組間均數分析使用單因素方差分析,兩兩組間分析運用L
3、SD分析,兩組相關數據間比較使用配對樣本t檢驗方法,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義;觀察健脾化瘀法中藥對肝癌細胞SMMC-7721遷移能力的抑制作用。
③通過Transwell侵襲性實驗觀察并計算24h、48h后的對照組和實驗組發(fā)生侵襲的細胞個數和侵襲抑制率,三組間均數分析使用單因素方差分析,兩兩組間分析運用LSD分析,兩組相關數據間比較使用配對樣本t檢驗方法,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義;觀察健脾化瘀法中藥對肝癌細胞SMM
4、C-7721侵襲能力的抑制作用。
結果:
?、貱CK-8法結果:健脾化瘀法中藥對SMMC-7721的增殖具有抑制作用,在給藥后48h,20%含藥組與10%正常組比較OD值明顯降低(P<0.05);在給藥后72h,10%、20%含藥血清組OD值較10%正常血清組均明顯降低(P<0.05);在給藥后48h、72h后,20%含藥血清組的增殖抑制率均明顯高于10%含藥血清組(P<0.05);比較20%含藥血清在給藥72h后的抑
5、制率較48h時明顯增高。
②細胞劃痕實驗:在給藥后24h、48h,10%含藥、20%含藥與10%正常比較愈合速率均明顯降低(P<0.05);20%含藥濃度下,24h與48h的遷移速率明顯降低(P<0.05);在給藥48h后,20%含藥血清對遷移的抑制率較10%含藥血清明顯增高(P<0.05)。
③在Transwell侵襲性實驗:在給藥48h后20%、10%含藥血清組與10%正常血清組比較,發(fā)生侵襲的細胞數均明顯減少(
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