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文檔簡介
1、目的:
1.抑制CDKs活性后觀察體外培養(yǎng)的人肝癌細胞SMMC-7721細胞周期時相分布的變化。
2.在細胞周期時相分布發(fā)生改變后觀察體外培養(yǎng)的人肝癌細胞SMMC-7721細胞侵襲力的變化。
3.探討細胞周期時相分布發(fā)生改變后外培養(yǎng)的人肝癌細胞SMMC-7721細胞侵襲力變化的可能機制。
方法:
1.將細胞分為A、B兩組(A組用終濃度為0μmol/L Roscovit
2、ine培養(yǎng)24h,B組用終濃度為32μmol/L Roscovitine培養(yǎng)24h)采用流式細胞術(shù)分別檢測A、B兩組體外培養(yǎng)的人肝癌細胞SMMC-7721細胞周期時相的分布。
2.用劃痕實驗、Transwell小室分別檢測A、B兩組體外培養(yǎng)的人肝癌細胞SMMC-7721水平運動能力和侵襲力。
3.用RT-PCR技術(shù)檢測A、B兩組體外培養(yǎng)的人肝癌細胞SMMC-7721 uPA、MMP-9mRMNA的表達。
3、> 結(jié)果:
1.B組處于G0/G1期肝癌細胞較A組比例升高(72.19±0.47%vs59.22±0.54%,P<0.05),S期細胞比例減少(18.95±0.24%vs26.34±0.20%,P<0.05)、G2/M期細胞比例減少(8.86±0.76%vs14.44±0.62%,P<0.05)。
2.大量肝癌細胞被阻滯在G0/G1期后體外培養(yǎng)的人肝癌細胞水平運動能力明顯下降(3.52±2.35vs14
4、.02±2.93,P<0.05),穿膜細胞數(shù)明顯減少(71.40±5.59vs149.60±16.36,P<0.05);侵襲能力下降。
3.大量肝癌細胞被阻滯在G0/G1期后體外培養(yǎng)的人肝癌細胞SMMC-7721 uPAmRNA的表達下降,MMP-9 mRNA的表達無明顯變化。
結(jié)論:
1.Roscovitine干預(yù)CDKs活性后可以使大量人肝癌細胞阻滯在G0/G1期。
2.體外培
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