轉(zhuǎn)染miR-145對(duì)肝癌細(xì)胞系SMMC-7721增殖和凋亡的影響.pdf

1、目的：研究miR-145對(duì)肝癌細(xì)胞株SMMC-7721增殖、細(xì)胞周期和凋亡的影響，評(píng)價(jià)其在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　方法：常規(guī)培養(yǎng)人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721，用脂質(zhì)體將miR-145質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入肝癌細(xì)胞株SMMC-7721中，實(shí)驗(yàn)分為3組：空白對(duì)照組，空載質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組，miR-145質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組，感染后72h，熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞，通過綠色熒光蛋白（GFP）表達(dá)判斷細(xì)胞的感染效率，實(shí)時(shí)定量RT-PCR檢測各組細(xì)胞miRNA-145

2、的表達(dá)，用MTT法檢測肝癌細(xì)胞的增殖能力，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞的凋亡及周期改變。
　　結(jié)果：熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率達(dá)80%。RT-PCR結(jié)果顯示：miR-145轉(zhuǎn)染組的miR-145表達(dá)水平較空載質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組，空白對(duì)照組明顯上調(diào)。MTT法結(jié)果顯示：miR-145轉(zhuǎn)染組的增殖抑制率明顯高于空載質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組和空白對(duì)照組（P<0.05）。流式細(xì)胞儀顯示轉(zhuǎn)染miR-145質(zhì)粒增加細(xì)胞內(nèi)miR-145表達(dá)后， G1期延長，凋亡率增高，差