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1、目的:探討組蛋白去乙?;敢种苿?,曲古霉素(TSA)對(duì)人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721細(xì)胞的增殖,以及對(duì)SMMC-7721細(xì)胞中趨化因子受體CXCR4在mRNA 及蛋白水平的表達(dá)的影響。
方法:1.分別用200,400,600,800nM/L TSA 處理體外培養(yǎng)SMMC-7721細(xì)胞24 小時(shí),通過(guò)細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)cck-8 法測(cè)定TSA 相應(yīng)濃度下的細(xì)胞抑制率。2.細(xì)胞免疫組化法觀察TSA 800nM/L 處理后的SMMC-
2、7721細(xì)胞的趨化因子受體CXCR4的表達(dá)。3.普通PCR及Real-Time PCR法檢測(cè)細(xì)胞經(jīng)TSA (800nM/L)處理后,CXCR4在mRNA表達(dá)上的變化。4.Western blot 法檢測(cè)經(jīng)過(guò)TSA(400nM/L,800nM/L)處理后趨化因子受體CXCR4在蛋白水平上的變化。
結(jié)果:組蛋白去乙?;敢种苿㏕SA 具有顯著抑制SMMC-7721細(xì)胞增殖的作用,且隨著作用濃度的升高抑制率逐漸增強(qiáng)(P<0.05
3、)。腫瘤細(xì)胞經(jīng)TSA 處理后,趨化因子受體CXCR4表達(dá)顯著增強(qiáng),細(xì)胞免疫組化可見(jiàn),處理組相較對(duì)照組細(xì)胞陽(yáng)性率增加,胞漿內(nèi)棕色顆粒明顯增多,普通PCR及Real-Time PCR結(jié)果顯示,處理后腫瘤細(xì)胞中CXCR4 mRNA 量較對(duì)照組增強(qiáng)2.116倍(P<0.05)。最后,Western blot 法檢測(cè)也表明,TSA 處理組腫瘤細(xì)胞的CXCR4在蛋白水平也顯著上調(diào)。
結(jié)論:組蛋白去乙?;敢种苿㏕SA在體外對(duì)人肝癌細(xì)胞
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