ADFMChR對SMMC-7721細(xì)胞生長及腫瘤相關(guān)基因表達(dá)的影響.pdf

1、目的:觀察5-烯丙基-7-二氟亞甲基白楊素(5-ally-7-gen-difluormethylenechrysin,ADFMChR)抑制人肝癌SMMC-7721細(xì)胞生長作用,探討其作用是否涉及活化PPARγ,分析ADFMChR誘導(dǎo)SMMC-7721細(xì)胞的腫瘤相關(guān)基因的基因表達(dá)譜改變,為尋找新的具有開發(fā)前景的候選抗腫瘤藥物提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和線索。
　　方法:體外培養(yǎng)SMMC-7721細(xì)胞。細(xì)胞計數(shù)法檢測ADFMChR、PPARγ阻斷劑

2、GW9662及兩者合用對SMMC-7721細(xì)胞生長的影響;平皿集落形成法檢測ADFMChR、GW9662及兩者合用對SMMC-7721細(xì)胞錨定依賴性生長的作用;軟瓊脂集落形成法檢測ADFMChR、GW9662及兩者合用對SMMC-7721細(xì)胞集落形成能力的影響;腫瘤相關(guān)基因芯片檢測ADFMChR誘導(dǎo)SMMC-7721細(xì)胞腫瘤相關(guān)基因表達(dá)譜的改變。
　　結(jié)果:細(xì)胞計數(shù)法結(jié)果顯示:1.0、3.0、10.0μM的ADFMChR處理48小

3、時均具有抑制SMMC-7721細(xì)胞生長作用,當(dāng)其濃度由1.0μM增加到10.0μM時,SMMC-7721細(xì)胞倍增時間由29.41小時延長到48.89小時,用10.0μMGW9662預(yù)孵育SMMC-7721細(xì)胞可拮抗ADFMChR的生長抑制作用。平皿集落形成法結(jié)果表明:1.0、3.0、10.0μM的ADFMChR對SMMC-7721細(xì)胞的集落抑制率分別為10.41％±3.67%,28.01%±2.40%,47.21%±8.66%,而GW9

4、662預(yù)孵育SMMC-7721細(xì)胞半小時后,3.0μMADFMChR處理48小時的集落抑制率是15.21%±6.04%,明顯低于ADFMChR(3.0μM)組(P<0.05)。軟瓊脂集落形成法結(jié)果顯示:隨ADFMChR濃度增加,集落均數(shù)明顯減少,而GW9662(10.0μM)預(yù)孵育30分鐘,3.0μM ADFMChR組的集落數(shù)高于3.0μM ADFMChR組（P<0.05)?；蛐酒Y(jié)果:3.0μM ADFMChR處理SMMC-7721

5、細(xì)胞4小時后有6個腫瘤相關(guān)基因上調(diào),分別為LCN2,MAPK13,MMP14,MMP17,MMP2,TFDP2,23個下調(diào)基因分別為ABCB1,ANPEP,RHOD,BHLHB2,CDKN1C,CRHR1,CTSD,DHRS2,FOXO1A,GPR39,ID1,JAK1,PCTK1,PCTK2,ZMYND8,SEMA3C,SMPD1,SPINT2,SRC,STAT2,TRRAP,UCHL1,VHL。
　　結(jié)論:1)ADFMChR抑