熒光原位雜交技術(shù)檢測非小細(xì)胞肺癌患者現(xiàn)場細(xì)胞學(xué)制片表皮生長因子受體基因擴增狀態(tài)的研究.pdf

1、目的:本研究創(chuàng)新性應(yīng)用熒光原位雜交（FISH）技術(shù)檢測非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）患者現(xiàn)場細(xì)胞學(xué)（ROSE）制片的表皮生長因子受體（EGFR）基因擴增狀態(tài)，旨在探討以NSCLC患者氣管鏡取得細(xì)胞學(xué)或組織塊標(biāo)本的ROSE制片為標(biāo)本，F(xiàn)ISH檢測其EGFR基因擴增狀態(tài)的應(yīng)用。以及探討EGFR基因擴增狀態(tài)在NSCLC患者中與其年齡、性別、吸煙狀態(tài)、病理類型、分化程度、腫瘤TNM分期等臨床特征的相關(guān)性。
　　方法:本研究在2013年9月至2

2、014年12月期間對就診于天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院呼吸內(nèi)科氣管鏡室且胸部 X線或 CT檢查懷疑肺部惡性腫瘤性病變而行診斷性治療的患者在氣管鏡檢查過程中予以ROSE制片指導(dǎo)其進(jìn)行程度。然后應(yīng)用FISH技術(shù)在原ROSE制片上檢測71例最終取材經(jīng)過病理科醫(yī)師細(xì)胞學(xué)或組織學(xué)確診為NSCLC患者的EGFR基因擴增狀態(tài)，并將FISH結(jié)果與患者臨床特征進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)比較。其數(shù)據(jù)結(jié)果應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計軟件處理，P<0.05視為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　

3、　結(jié)果:
　　1.在本研究中 ROSE惡性細(xì)胞陽性并且考慮 NSCLC的72例患者僅有3例因取材量小而未得到病理科確診，病理報告1例為未找到腫瘤細(xì)胞，另外2例為可見可疑核異質(zhì)細(xì)胞；另有2例現(xiàn)場 ROSE惡性細(xì)胞陽性但觀察形態(tài)考慮為小細(xì)胞肺癌（SCLC）的患者最終經(jīng)病理科確診病理類型為低分化鱗癌；本研究中ROSE對NSCLC患者制片中惡性細(xì)胞的現(xiàn)場診斷與最終病理確診的符合率可達(dá)95.9％，且研究進(jìn)行期間 ROSE診斷未出現(xiàn)假陰性的結(jié)

4、果；最終共搜集NSCLC患者ROSE制片71例行FISH檢測，其中有68例（95.8%）患者順利取得結(jié)果，另外3例患者ROSE制片分別因為1例細(xì)胞數(shù)目過少、1例細(xì)胞重疊過多影響信號讀取與1例雜交后出現(xiàn)部分區(qū)域無雜交信號及部分區(qū)域雜交率較低而導(dǎo)致FISH檢測的失敗。
　　2.其EGFR基因發(fā)生擴增，即FISH（+）的患者共23例，其中7例為簇狀擴增。EGFR基因擴增率為33.8%。并且經(jīng)過統(tǒng)計學(xué)分析，EGFR基因擴增狀態(tài)與患者性別（

5、χ2=0.176，P=0.675）、年齡（χ2=2.796，P=0.094）、吸煙狀態(tài)（χ2=0.584， P=0.445）、病理類型（χ2=1.248，P=0.264）、腫瘤分化程度（χ2=1.234，P=0.267）、腫瘤TNM分期（P=0.474）的統(tǒng)計結(jié)果均無明顯統(tǒng)計學(xué)差異（P均>0.05）。
　　結(jié)論:本研究搜集NSCLC患者ROSE制片，創(chuàng)新性的應(yīng)用FISH技術(shù)在ROSE制片的原片上進(jìn)行EGFR基因擴增的檢測，研究結(jié)果

6、表明：
　　1. NSCLC患者氣管鏡細(xì)胞學(xué)及組織塊標(biāo)本的ROSE閱片結(jié)果與最終診斷結(jié)果一致性良好，并且FISH技術(shù)可應(yīng)用于ROSE制片作為標(biāo)本來檢測EGFR基因的擴增狀態(tài)，此方法不僅使得細(xì)胞學(xué)的FISH研究更加科學(xué)、嚴(yán)謹(jǐn)；而且較傳統(tǒng)方法更加快捷、經(jīng)濟。但應(yīng)注意提高氣管鏡室 ROSE制片的質(zhì)量，因為其質(zhì)量可直接影響氣管鏡檢查的進(jìn)度及 FISH結(jié)果的取得。FISH結(jié)果的順利取得還需在進(jìn)行過程中注意雜交區(qū)域的正確選擇、水浴與消化等步驟