尾葉拉藤化學(xué)成分及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、尾葉拉藤(Stauntonia obovatifoliola Hayata subsp.urophylla(Hand.-Mazz)H.N.Qiu)為木通科野木瓜屬植物，具有祛風(fēng)活絡(luò)、活血止痛、利尿消腫的功效，在民間長期作為野木瓜被廣泛用來治療風(fēng)濕痹痛、三叉神經(jīng)痛、跌打損傷、痛經(jīng)、小便不利和水腫等病癥。
　　中藥野木瓜(S.chinensis DC.)為2010版《中國藥典》收載品種，采用HPLC檢測法其指標(biāo)性成分荷苞花苷B的含量通

2、常為0.04％。同屬植物五指拉藤(S.obovatifoliola Hayata subsp.intermedia(Y.C.Wu) T.Chen)、鈍藥野木瓜（S.leucanthaDiels ex Y.C.Wu）、短藥野木瓜（S.brachyanthera Hand.-Mazz）已經(jīng)被2003版《貴州中藥材民族藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》所收載，但都沒有相關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和化學(xué)成分記載。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)木通科野木瓜屬植物五指拉藤(S.obovatif

3、oliola Hayatasubsp.)富含三萜類成分，其中16β-hydroxy-2，3-seco-lup-20(29)-ene-2，3-dioic acid（IC50=8.7μM）等化合物顯示出抗艾滋病病毒蛋白酶活性。由于同屬植物常含有結(jié)構(gòu)相同或相似的化學(xué)成分，為系統(tǒng)研究野木瓜屬植物化學(xué)成分，拓展中藥野木瓜(S.chinensis DC.)藥材資源，本課題開展尾葉拉藤的化學(xué)成分和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究研究。
　　干燥的尾葉拉藤地上部分，

4、采用75％的乙醇室溫下冷浸提取，提取物分別用乙酸乙酯和正丁醇萃取，采用反復(fù)硅膠柱色譜、反相柱色譜、葡聚糖凝膠柱色譜等色譜方法分離得到9個已知化合物。運用質(zhì)譜、1H-NMR、13C-NMR等波譜分析技術(shù)，結(jié)構(gòu)分別確定為:羽扇豆酮(1)、羽扇豆醇(2)、豆甾醇(3)、3β-乙?；R墩果酸(4)、Resinone(5)、胡蘿卜苷(6)、β-谷甾醇(7)、正丁基-α-D-呋喃果糖苷(8)、齊墩果烷-12-烯-23-醇-3-O-α-L-吡喃葡萄糖

5、苷(9)。這些化合物均為首次從尾葉拉藤中分離得到。
　　采用正交法對尾葉拉藤中荷苞花苷B的提取方法進行優(yōu)化，經(jīng)高效液相色譜法對貴州3個產(chǎn)地尾葉拉藤中的荷苞花苷B的含量進行測定，并與2010版《中國藥典》所收載的同屬植物野木瓜（S.chinensis DC.）中荷苞花苷B的含量相比較，探索有無替代的可能性。按藥典方法，采用色譜柱:Welchrom C18(250 mm×4.6mm，5μm);流動相:甲醇-0.1％磷酸水溶液(38∶6

6、2);流速:1.0 ml·min-1;檢測波長:324 nm;進樣量:10μL;柱溫:30℃。荷苞花苷B的保留時間為16.5min，在4.4×10-5～6.6×10-4μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程:Y=3×109x-5883，r2=0.999。方法的回收率為100.19％，RSD為2.63％，測得遵義、都勻、黎平尾葉拉藤中荷苞花苷B的含量分別為0.102％、0.154％、0.217％，RSD分別為1.711％、1.642％、1.00

7、1％。均高于《中國藥典》所收載品種野木瓜中的荷苞花苷B的含量0.04％，具有作為藥典收載品種替代品使用的可能性。
　　采用苯酚-硫酸比色法測定尾葉拉藤中的多糖和總糖含量。最大吸收波長490nm，葡萄糖在0～88.9μg之間線性關(guān)系好，回歸曲線Y=6.0×10-3 X+0.001，r2=0.999。尾葉拉藤中多糖含量為3.85％(RSD=2.09％，n=6)，平均加樣回收率101.37％(RSD=2.75％，n=6);尾葉拉藤中總糖