六葉龍膽化學成分及質(zhì)量標準研究.pdf

1、目的:對民間草藥六葉龍膽（Gentiana hexaphylla Maxim.ex Kusnez.）進行化學成分的分離試驗研究，掌握其所含的主要化學成分;對其生藥學特征的研究、主要藥效成分龍膽苦苷的含量測定、建立六葉龍膽的質(zhì)量標準，控制其藥材質(zhì)量標準。
　　方法:主要化學成分提取分離:對六葉龍膽全草（約1.2kg）切碎后，用20倍量的70％乙醇回流提取兩次，每次2小時，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收乙醇得到總浸膏，依次用石油醚(60-90℃)、乙酸

2、乙酯、正丁醇等體積進行萃取至近無色，得到石油醚部分、乙酸乙酯部分、正丁醇部分浸膏。其中正丁醇部分、乙酸乙酯部分浸膏，分別依次采用硅膠色譜柱層析、凝膠柱色譜層析、開放ODS柱色譜層析、制備液相分離方法進行單體化合物分離。
　　主要安全和有效性指標測定:依據(jù)2010年版《中國藥典》一部附錄項下相關(guān)標準，采用理化方法對六葉龍膽根、莖、葉等部位進行了橫切面觀察研究、薄層色譜法鑒別項研究，進行了水分測定法、灰分測定法、浸出物含量測定以及重金

3、屬限量檢查方法進行相關(guān)安全性項目的分析研究，采用高相液相色譜法對其主要藥效成分龍膽苦苷進行含量測定的品質(zhì)分析研究。
　　結(jié)果:六葉龍膽藥材的乙酸乙酯提取物中分離得到1個化合物，正丁醇提取物中共分離得到9個化合物，通過理化性質(zhì)及光譜數(shù)據(jù)分析(UV、IR、1D-NMR、2D-NMR、MS)鑒定了它們的結(jié)構(gòu):化合物1是龍膽苦苷，化合物2是當藥苷，化合物3是當藥苦苷，化合物4是Poacynose，化合物5是5，7，3'，4'-四羥基-8-

4、C-β-D-葡萄糖黃銅碳苷，化合物6是三葉草苷，化合物7是vanillyl alcohol-4-O-β-D-glucopyranoside，化合物8是異它喬糖甙，化合物9是1，5-bis(β-D-glucopyranosyloxy-2-(3'，3'-dimethylallyl)benzene，化合物10是6-hydroxy-2-(hydroxymethyl) phenylβ-D-glucopyranoside。其中化合物1、2、3、6是

5、裂環(huán)烯醚萜苷，化合物5是黃酮苷。上述化合物均為首次從該種植物中分離得到。
　　對六葉龍膽生藥學特征有了初步認識，確定了以龍膽苦苷作為對照品，以三氯甲烷:甲醇:水(30:10∶3)下層溶液為展開劑系統(tǒng)的薄層色譜法鑒別方法。六葉龍膽中龍膽苦苷含量不得低于0.8％。確立了檢查項下水分不得過10.0％;總灰分不得過6.0％，酸不溶灰分不得過1.0％;水溶液熱浸法浸出物不得低于25.0％。鉛不得過百萬分之一、鎘不得過千萬分之二、砷不得過千萬