氣單胞菌的耐藥現(xiàn)狀及對(duì)喹諾酮類抗生素耐藥機(jī)制的研究.pdf

1、目的:
　　調(diào)查浙江地區(qū)臨床及環(huán)境來(lái)源的氣單胞菌對(duì)抗生素的耐藥現(xiàn)狀，篩查人體腸道外分離氣單胞菌的耐藥基因，并研究其對(duì)喹諾酮類藥物的耐藥機(jī)制，為臨床治療和預(yù)防氣單胞菌感染提供重要依據(jù)并為日后的研究工作打下基礎(chǔ)。
　　方法:
　　收集2010年6月～2014年12月浙江地區(qū)急性腹瀉患者來(lái)源氣單胞菌（腸道內(nèi)組）、同期浙江大學(xué)附屬第一醫(yī)院住院患者腸道外分離氣單胞菌（腸道外組）及2013年6月～2014年12月環(huán)境來(lái)源氣單胞菌（

2、環(huán)境組），采用紙片擴(kuò)散法測(cè)定所有菌株對(duì)20種抗生素的敏感性。采用聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction，PCR)對(duì)腸道外氣單胞菌的喹諾酮類耐藥基因gyrA、gyrB、parC、parE、qnrA、qnrB、 qnrS、 aac(6')-Ib-cr和qepA進(jìn)行擴(kuò)增篩查，基因序列比對(duì)分析gyrA、gyrB、parC、parE基因的突變情況，分析腸道外氣單胞菌對(duì)喹諾酮類抗生素的耐藥表型和耐藥基因的關(guān)聯(lián)性。
　

3、　結(jié)果:
　　1.共收集到腸道內(nèi)氣單胞菌303株，最多的為豚鼠氣單胞菌，占37.3％;腸道外氣單胞菌共118株，以嗜水氣單胞菌為主，占55.9％;環(huán)境氣單胞菌共79株，以溫和氣單胞菌為主，占58.2％。三組間菌種分布存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＜0.01)。、
　　2.所有氣單胞菌對(duì)所測(cè)抗生素耐藥性最高的均依次為氨芐西林—舒巴坦，阿莫西林-克拉維酸和頭孢唑啉。其中腸道內(nèi)氣單胞菌對(duì)上述三種藥物的耐藥率分別為94.1％，92.1％和58.

4、7％;腸道外氣單胞菌分別為95.8％，95.8％和83.1％;環(huán)境氣單胞菌分別為68.4％、64.6％和38.0％。所有氣單胞菌對(duì)二三代頭孢和碳青霉烯類抗生素均較敏感。除氨芐西林—舒巴坦和阿莫西林-克拉維酸外，腸道內(nèi)外氣單胞菌對(duì)其它抗生素的耐藥性均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。另外對(duì)腸道外氣單胞菌加測(cè)萘啶酸，耐藥率高達(dá)66.1％。
　　3.118株腸道外氣單胞菌qnrS基因陽(yáng)性率16.1％，aac(6')-Ib-cr基因陽(yáng)性率19.5％。同時(shí)存

5、在qnrS基因和aac(6')-Ib-cr基因的氣單胞菌有9株，占7.6％。未檢測(cè)出qnrA、qnrB和qepA基因。共39株(33.1％)檢測(cè)到gyrA基因，82株(69.5％)檢測(cè)到gyrB基因，52株(44.1％)檢測(cè)到parC基因，未檢測(cè)出parE基因。gyrA基因的喹諾酮耐藥決定區(qū)（QRDRs）內(nèi)的有82、83和86三處氨基酸位點(diǎn)突變，以Ser83→Ile為主。parC基因QRDRs內(nèi)有78和80氨基酸位點(diǎn)的改變。未檢測(cè)出gy

6、rB基因QRDRs內(nèi)的突變。
　　結(jié)論:
　　1.腸道內(nèi)、腸道外和環(huán)境分離的氣單胞菌在菌種分布上存在差異。
　　2.氣單胞菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素不同程度耐藥，對(duì)二三代頭孢菌素和碳青霉烯類表現(xiàn)敏感。腸道外氣單胞菌對(duì)各類抗生素的耐藥性較腸道內(nèi)和環(huán)境組均有明顯增加。
　　3.gyrA基因是喹諾酮類藥物作用的主要靶位基因，其Ser83→Ile突變頻率最高，parC基因是喹諾酮類藥物作用的第二靶位基因，主要為第80位氨基酸