祁州漏蘆乙醇提取物對Chang Liver細胞損傷的保護作用.pdf

1、目的:探索祁州漏蘆乙醇提取物(RUEE)對過氧化氫(H2O2)致肝細胞損傷的保護作用。
　　方法:1.確定RUEE對Chang Liver細胞的安全濃度范圍:利用MTT法測定ChangLiver細胞在不用藥物濃度下的細胞存活率，確定實驗所用藥物濃度范圍。2.建立RUEE抗H2O2誘導Chang Liver細胞氧化應激模型:將培養(yǎng)良好的Chang Liver細胞分為正常對照組、模型組、RUEE高、中、低劑量組，正常對照組和模型組用無

2、血清培養(yǎng)液培養(yǎng)24h，各藥物組用含RUEE(100、50、25mg/L)無血清培養(yǎng)液培養(yǎng)24h，模型組和藥物組用300μmol/L H2O2誘導損傷2h來建立氧化應激損傷模型。3.RUEE對H2O2誘導Chang Liver細胞的保護作用研究:①利用MTT法測定氧化應激模型的細胞存活率;②比色法測定各組細胞培養(yǎng)液中LDH、ALT和AST的活性;③比色法測定各組細胞內MDA含量和GSH活性;④利用Westernblot法檢測各組細胞中的N

3、rf2蛋白的含量。
　　結果:1.RUEE的安全濃度范圍:RUEE在12.5～100mg/L范圍內，對Chang Liver細胞存活率無顯著影響，不具細胞毒作用。因此，本研究分別選100、50、25mg/L為RUEE高、中、低劑量。2.RUEE對H2O2誘導損傷Chang Liver細胞的保護作用:①細胞存活率結果顯示，與正常對照組比較，模型組的細胞存活率為（54.1±4.8）％，顯著降低(P＜0.05);經(jīng)RUEE干預后，高、中

4、、低劑量RUEE組的細胞存活率分別增高到（84.6±12.1）％、（82.5±5.6）％和（73.4±3.3）％（P＜0.05）;②與正常對照組比較，模型組培養(yǎng)液LDH、ALT、AST活性顯著升高（P＜0.05）;與模型組比較，RUEE高、中、低劑量組培養(yǎng)液中LDH和ALT、AST活性顯著降低(P＜0.05);③與正常對照組比較，模型組細胞MDA含量顯著升高(P＜0.05)，GSH含量顯著降低（P＜0.05）;與模型組比較，RUEE各劑