辛伐他汀對(duì)大鼠子宮內(nèi)膜異位癥的抑制作用及對(duì)IGFs和Livin表達(dá)的影響.pdf

1、研究背景與目的：
　　子宮內(nèi)膜異位癥(Endometriosis，EMS)是指有活性的內(nèi)膜組織細(xì)胞在子宮腔以外的地方種植生長(zhǎng)，從而形成的一種良性疾病。發(fā)病機(jī)制的理論主要有經(jīng)血逆流、盆腔種植和體腔上皮化生學(xué)說(shuō)，同時(shí)，盆腔及體液中的各種酶類、細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子也起著重要作用[1]。EMS雖是良性病變，但其廣泛種植、易復(fù)發(fā)的特性與惡性腫瘤十分相似。異位的內(nèi)膜會(huì)生長(zhǎng)、種植、浸潤(rùn)及粘連周圍組織，從而進(jìn)一步引起患者慢性盆腔疼痛及不孕等癥狀。根

2、據(jù)子宮內(nèi)膜異位癥易復(fù)發(fā)的特性其主要以藥物治療為主。他汀類藥物是廣泛應(yīng)用于高血脂治療的一類高效降脂藥物。屬于羥甲基戊二酰輔酶A(hydroxymethyl-glutaryl coenzyme A， HMG-CoA)還原酶抑制劑，主要經(jīng)過(guò)阻礙內(nèi)源性膽固醇合成限速酶(HMG-CoA)還原酶的作用，達(dá)到降低體內(nèi)膽固醇的進(jìn)一步合成。最新研究表明[2]，他汀類藥物可用于子宮內(nèi)膜異位癥的治療，該藥具有良好的抑制異位病灶組織增殖和抗血管生成的作用，并還

3、有降低雌激素水平的療效。胰島素樣生長(zhǎng)因子(Insulinlike gowth factors，IGFs)是一類擁有多種功能并積極參加細(xì)胞增殖調(diào)控的因子。在組織細(xì)胞的分化、增殖、個(gè)體的生長(zhǎng)發(fā)育中具有重要的作用。研究表明[3]，各種因素所引起的子宮內(nèi)膜組織中的 IGF失衡，將導(dǎo)致組織及血液中的胰島素生長(zhǎng)因子1(Insulin-like growth factor-1，IGF-1)升高及胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3（Insulin-like g

4、rowth factor binding proteins-3,IGFBP-3）表達(dá)降低。IGF-1的異常升高能促進(jìn)細(xì)胞的有絲分裂而加速異位內(nèi)膜細(xì)胞的增殖生長(zhǎng)，并抑制異位內(nèi)膜的凋亡，使異位內(nèi)膜細(xì)胞繼續(xù)存活，從而最終引起EMS的發(fā)生發(fā)展。IGFBP-3是血液中濃度最高的胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白，它通過(guò)自分泌、旁分泌的方式對(duì)組織中游離的 IGFs的生物學(xué)活性起著重要的調(diào)控作用[5]。凋亡抑制因子（inhibitor of apoptosis

5、 proteins,IAPs）屬于內(nèi)源性高度保守的一類抗組織細(xì)胞凋亡因子家族，而Livin蛋白又是其中抗凋亡活性最強(qiáng)的一員。研究顯示，Livin在子宮內(nèi)膜異位癥患者中的異位內(nèi)膜表達(dá)顯著升高。Livin抑制細(xì)胞凋亡的機(jī)制主要有兩條途徑：一是抑制Caspase途徑，降低它們的活性，從而阻礙細(xì)胞凋亡；二是激活TAK1/JNK1信號(hào)傳導(dǎo)途徑，這是Livin抵抗TNFa和ICE介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡作用的又一主要途徑。推測(cè)通過(guò)以上兩種途徑導(dǎo)致Livin蛋

6、白對(duì)子宮內(nèi)膜細(xì)胞抗凋亡能力增加，引起異位內(nèi)膜組織生存和種植能力增強(qiáng)最終導(dǎo)致EMS的發(fā)生發(fā)展。本文通過(guò)建立SD大鼠動(dòng)物模型，研究辛伐他汀藥物用于治療子宮內(nèi)膜異位癥的療效，通過(guò)觀察對(duì)照組及用藥組大鼠異位病灶及子宮重量的變化，并檢測(cè)IGF-1、IGFBP-3及Livin在對(duì)照組及用藥組中異位內(nèi)膜和在位內(nèi)膜中的陽(yáng)性表達(dá)量，來(lái)推測(cè)辛伐他汀可能具有潛在治療或者逆轉(zhuǎn)子宮內(nèi)膜異位癥的作用。
　　研究對(duì)象與方法：
　　1、實(shí)驗(yàn)材料：SPF級(jí)健

7、康雌性SD大鼠45只，平均周齡為8周，平均體重為220～300g。購(gòu)自河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心（許可證號(hào)SCXK（豫）2010-0002）。普通飼料（標(biāo)準(zhǔn)嚙齒類）均購(gòu)自河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。辛伐他汀購(gòu)自本院藥房。
　　2、實(shí)驗(yàn)方法：建立 SD大鼠子宮內(nèi)膜異位癥動(dòng)物模型，4周后將建模成功的大鼠隨機(jī)分為A組（對(duì)照組）、B組（高劑量組）及C組（低劑量組），采用灌胃連續(xù)給藥21d，觀察各組異位病灶大小及子宮重量的變化，采用免疫組SP化法測(cè)定對(duì)照組

8、與用藥組大鼠在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜中IGF-1、IGFBP-3及Livin的陽(yáng)性表達(dá)量。
　　3、統(tǒng)計(jì)方法：采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以(X)± S表示，樣本間采用單因素方差分析，相關(guān)分析采用Pearman相關(guān)性分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.辛伐他汀藥物治療后，用藥組EMS大鼠的子宮重量及異位病灶體積較對(duì)照組明顯減輕及縮小，且高劑量組療效較低劑量組顯著，兩組相比均

9、有顯著差異(P<0.05)。
　　2.IGF-1的表達(dá)：IGF-1的陽(yáng)性表達(dá)為棕黃色顆粒，分布于子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞的細(xì)胞漿，在間質(zhì)細(xì)胞的胞漿也有少量表達(dá)。比較用藥組在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜的陽(yáng)性表達(dá)量與對(duì)照組在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜的陽(yáng)性表達(dá)量顯示，用藥組中兩組內(nèi)膜組中的IGF-1的陽(yáng)性表達(dá)顯著降低（P<0.05），且高劑量組IGF-1陽(yáng)性表達(dá)量又低于低劑量組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　3.IGFBP-3的表達(dá)：IGFB

10、P-3的陽(yáng)性表達(dá)為棕黃色顆粒，分布于子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞胞漿及間質(zhì)細(xì)胞胞漿。比較用藥組的在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜的陽(yáng)性表達(dá)量與對(duì)照組在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜的陽(yáng)性表達(dá)量顯示：用藥組中兩組內(nèi)膜組中的IGFBP-3的陽(yáng)性表達(dá)量顯著升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且高劑量組陽(yáng)性表達(dá)量與低劑量組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　4.Livin的表達(dá)：Livin蛋白的陽(yáng)性表達(dá)為棕黃色顆粒，主要分布于子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞的胞漿中。比較用藥

11、組在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜的陽(yáng)性表達(dá)量與對(duì)照組在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜的陽(yáng)性表達(dá)量顯示用藥組中兩組內(nèi)膜組中的Livin的陽(yáng)性表達(dá)顯著降低（P<0.05），且高劑量組Livin陽(yáng)性表達(dá)量又低于低劑量組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　5.高劑量組 IGF-1、IGFBP-3及 Livin在異位內(nèi)膜組織中相關(guān)性比較：異位內(nèi)膜 IGF-1和 IGFBP-3的相關(guān)性比較：IGF-1與 IGFBP-3的表達(dá)存在負(fù)相關(guān)( r=-0.740, P

12、<0.05)。異位內(nèi)膜IGF-1和Livin的相關(guān)性比較：IGF-1與Livin的表達(dá)存在正相關(guān)(r=0.634,P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1、使用辛伐他汀的EMS大鼠的異位病灶明顯縮小且子宮重量有所減輕，推測(cè)辛伐他汀可能通過(guò)抑制異位病灶組織的增殖達(dá)到治療子宮內(nèi)膜異位癥的作用。
　　2、對(duì)比用藥后IGF-1、IGFBP-3及Livin的陽(yáng)性表達(dá)量變化提示 IGF-1、IGFBP-3及Livin均參與了EMS的發(fā)