直腸癌Pd-L1表達(dá)相關(guān)因素分析及預(yù)后研究.pdf

1、程序性死亡配體-1(PD-L1)和程序性死亡受體-1(PD-1)是一對(duì)免疫共抑制分子，二者在腫瘤免疫耐受機(jī)制中發(fā)揮著重要作用。腫瘤細(xì)胞表達(dá)的PD-L1可通過(guò)與腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(TIL)表面的PD-1接觸傳遞抑制性信號(hào)，負(fù)性調(diào)控T細(xì)胞的功能，從而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞免疫逃逸的發(fā)生。因此，阻斷PD-L1信號(hào)通路成為腫瘤免疫治療的一種新策略。目前，PD-L1抗體已經(jīng)在黑色素瘤、非小細(xì)胞肺癌等多種腫瘤治療中取得顯著的臨床效果，但是在直腸癌的治療中效果并

2、不明顯，原因尚不清楚。有研究表明，黑色素瘤細(xì)胞膜表達(dá)PD-L1與腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞分布具有顯著一致性，認(rèn)為TIL可能通過(guò)某些機(jī)制驅(qū)動(dòng)黑色素瘤細(xì)胞PD-L1表達(dá)上調(diào)，進(jìn)而形成適應(yīng)性的免疫逃逸，這也是PD-1/PD-L1通路阻滯劑在黑色素瘤治療中取得顯著療效的原因。而直腸癌中PD-L1表達(dá)水平與TIL的浸潤(rùn)情況相關(guān)關(guān)系的研究尚未見報(bào)道。另外，關(guān)于PD-L1對(duì)于判斷直腸癌預(yù)后的研究結(jié)論也存在很大分歧。
　　目的:采用組織芯片技術(shù)及免疫組織

3、化學(xué)方法，檢測(cè)直腸癌組織中PD-L1表達(dá)情況及TIL浸潤(rùn)水平，通過(guò)分析二者關(guān)系探討PD-1/PD-L1通路在直腸癌免疫耐受中發(fā)揮作用情況，為PD-L1阻斷劑治療直腸癌的可行性提供細(xì)胞水平的證據(jù)支持;同時(shí)通過(guò)分析PD-L1表達(dá)與患者預(yù)后的關(guān)系，探討PD-L1作為直腸癌預(yù)后標(biāo)志物的臨床價(jià)值。
　　方法:(1)納入2010年1月-12月間在解放軍總醫(yī)院普通外科行手術(shù)治療的直腸癌患者97例，通過(guò)電子病歷系統(tǒng)采集臨床病理資料;(2)通過(guò)電話

4、隨訪進(jìn)行生存期統(tǒng)計(jì);(3)從病理科收集納入患者的腫瘤組織蠟塊，制作組織芯片，取3張連續(xù)切片，1張進(jìn)行HE染色，2張進(jìn)行免疫組化染色，分別標(biāo)記腫瘤組織PD-L1分子及TIL表面CD3分子;(4)使用SPSS17.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，統(tǒng)計(jì)方法分別采用Fisher精確概率法、Logistic回歸分析、Kaplan-Meier曲線、log-rank檢驗(yàn)以及COX生存分析等。
　　結(jié)果:(1)97例患者腫瘤組織中PD-L1表達(dá)陽(yáng)性率為43.3％

5、(42/97);采用Fisher精確概率法檢驗(yàn)不同程度TIL浸潤(rùn)時(shí)PD-L1表達(dá)情況，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，TIL浸潤(rùn)程度越高，PD-L1陽(yáng)性率越高。(2) x2檢驗(yàn)單因素分析PD-L1表達(dá)與臨床病理資料的關(guān)系，結(jié)果顯示，直腸癌細(xì)胞PD-L1表達(dá)情況與腫瘤分化程度（P=0.034）、TNM分期（P=0.033）相關(guān)，而與患者的性別、年齡、腫瘤位置、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移情況等均無(wú)關(guān)(P＞0.05);納入TIL浸潤(rùn)

6、程度作為影響因素，進(jìn)行Logistic回歸分析結(jié)果顯示，TIL浸潤(rùn)程度是PD-L1表達(dá)的獨(dú)立影響因素，OR值為1.99(95％ CI:1.123-3.523;P=0.018);而腫瘤分化程度、TNM分期并非影響PD-L1表達(dá)的獨(dú)立因素。(3)97例患者中位生存時(shí)間62.6個(gè)月（6-71.7個(gè)月），五年生存率71.1％;利用Kaplan-Meier曲線和log-rank檢驗(yàn)結(jié)果顯示，PD-L1陽(yáng)性表達(dá)與陰性表達(dá)的患者在生存期上的差異沒(méi)有統(tǒng)

7、計(jì)學(xué)意義（P=0.165）。(4)利用Cox風(fēng)險(xiǎn)比例模型多因素分析結(jié)果顯示，PD-L1經(jīng)校正的HR值為2.239（95％ CI:0.952-5.262; P=0.067）;TIL經(jīng)校正的HR值為0.390（95％ CI:0.232-0.670;P=0.001）;腫瘤分化程度經(jīng)校正的HR值為1.945（95％CI:1.130-3.369; P=0.016）;TNM分期經(jīng)校正的HR值為1.821(95％CI:1.159-2.869; P=0

8、.009); TIL浸潤(rùn)程度高是延長(zhǎng)生存期的有利因素;腫瘤分化程度低、TNM分期晚對(duì)于延長(zhǎng)生存時(shí)間是不利因素;PD-L1表達(dá)對(duì)預(yù)后沒(méi)有影響(P=0.067)。
　　結(jié)論:(1)直腸癌細(xì)胞PD-L1表達(dá)水平與腫瘤微環(huán)境中T淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)程度呈正相關(guān)，二者在分布區(qū)域上具有高度一致性，說(shuō)明PD-1/PD-L1通路作為一種適應(yīng)性的免疫抵抗機(jī)制在直腸癌免疫逃逸中發(fā)揮作用;(2) PD-L1抗體治療直腸癌在理論上是有效的，但由于PD-L1表達(dá)及