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文檔簡介
1、目前,腦血管病仍是危害人類健康的三大致死性疾病之一[1],隨著全球老齡化的到來,預計未來20年內腦梗死的發(fā)病率還會繼續(xù)上升[2]。其高發(fā)病率、高致殘率、高死亡率和高復發(fā)率、逐漸年輕化的特點,已經(jīng)造成了嚴重的社會和家庭負擔。因此,研究如何治療腦卒中仍是國內外學者、科學家的重要任務。循證醫(yī)學證明,重組組織型纖溶酶(r-tPA)是臨床上治療腦梗死的唯一有效藥物,但是由于受到溶栓時間窗短暫及溶栓治療后的出血轉化的限制,僅有3%-8.5%的腦卒中
2、患者能夠獲益。如何對時間窗外急性腦梗死患者在西醫(yī)西藥治療的基礎上給予更加有效的治療,是擺在我們面前的難題,祖國醫(yī)學中醫(yī)藥治療為我們帶來了廣闊的前景。中藥是含有多種成份的復合體,經(jīng)過多種藥物的合理配伍,恰好具備了這種多機制、多靶點的治療優(yōu)勢。以往治療腦缺血的研究主要側重于神經(jīng)保護或血管保護,作用單一,而缺血后各細胞能否存活或修復有賴于各種細胞間的相互作用及信號傳遞,結果收效甚微。因此,研究中藥復方康腦液能否通過對神經(jīng)、血管功能等多方面保護
3、,減輕腦缺血再灌注損傷,對指導臨床具有重大現(xiàn)實意義。腦缺血再灌注損傷機制錯綜復雜,腦缺血本身可刺激腦內分泌多種神經(jīng)營養(yǎng)因子的,其中一些神經(jīng)營養(yǎng)因子[3-6]具有神經(jīng)、血管的雙重保護作用,如血管內皮生長因子(VEGF)、腦源性神經(jīng)生長因子(BDNF)。同時,腦缺血誘導細胞炎性因子釋放及破壞細胞結構,導致血腦屏障的完整性破壞,引起腦水腫及出血性轉化,進一步加重神經(jīng)功能缺失的臨床表現(xiàn)。其中基質金屬蛋白酶(matrix metalloprote
4、inase,MMPs)參與炎癥損傷反應,并在維持血腦屏障的功能等方面起負面影響[7]。
本實驗主要通過建立腦缺血再灌注損傷的大鼠動物模型,觀察康腦液對腦缺血再灌注大鼠的神經(jīng)行為、梗死灶面積和組織病理形態(tài)改變的影響;觀察其對腦缺血再灌注大鼠血管內皮生長因子(vascularendothelial growth factor,VECF)、腦源性神經(jīng)生長因子(brain derivedneurotrophic factor,BDNF
5、)、基質金屬蛋白酶(matrix metalloproteinas-e-9,MMP-9)、細胞外信號調節(jié)激酶(extracellular signal-regulatedkinase1 and2,ERK1/2)表達的影響,探討康腦液對腦缺血再灌注大鼠的腦保護機制。
將雄性SD大鼠隨機分為正常組(Normal,n=36),假手術組(Shamo-perated,n=36),腦缺血再灌注模型組(I/R,n=36),康腦液高、中、低劑
6、量組(KNYH,KNYM,KNYL;28.6,14.3,7.15 g·kg-1·d-1;n=36);采用改進Longa等線栓法制備右側大腦中動脈阻塞(middle cerebral arteryocclusion,MCAO)再灌注大鼠模型,于缺血2h后再灌注(分別于再灌注后6h,12h,24h,3d,7d后,處死大鼠)。采用longa評分法進行神經(jīng)行為學評分;將組織進行HE染色后,使用光學顯微鏡觀察腦組織病理改變;采用TTC染色法測定腦
7、梗死體積;免疫組織化學法、原位雜交法觀察大鼠腦內腦組織VEGF、BDNF、MMP-9、ERK1/2的表達規(guī)律。
與正常組及假手術組大鼠相比較,模型組大鼠腦缺血再灌注損傷后可見明顯的神經(jīng)行為改變及功能缺損;病變局部可見明顯的梗死灶且面積較大;神經(jīng)元細胞腫脹明顯;腦組織中表達的VEGF、BDNF、MMP-9、ERK1/2數(shù)量明顯升高,差異具有顯著性(P<0.05或P<0.01)。與模型組比較,康腦液高、中劑量劑量組大鼠腦缺血再灌注
8、損傷后神經(jīng)系統(tǒng)功能缺損癥狀均得到不同程度的改善,腦梗死體積減小,神經(jīng)元腫脹及間質水腫等病理學改變得到不同程度減輕,腦組織中VEGF、BDNF及ERK1/2的表達量升高,而MMP-9表達量降低,具有顯著性差異(P<0.05)??的X液低劑量組與康腦液模型組比較無顯著差異(P>0.05)。
康腦液可促進大鼠局灶性腦缺血后腦組織中VEGF、BDNF的表達,激活ERK1/2信號通路,同時抑制腦內MMP-9的表達,縮小梗死面積,降低神經(jīng)行
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