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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探討 NADPH氧化酶 Nox1和 Duox2在小鼠腸炎發(fā)病中的表達(dá)及意義。
方法:將6-8周齡的 C57BL/6小鼠隨機(jī)分為正常組、1.5%葡聚糖硫酸鈉(DSS)組和3%DSS組,每組10只。正常組正常飲水,1.5%和3%DSS組分別自由飲用含有1.5%或者3%DSS的飲水,共6天建立小鼠急性腸炎模型。通過(guò)進(jìn)行疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)評(píng)分、結(jié)腸長(zhǎng)度測(cè)定、血便評(píng)分和 HE染色等方法評(píng)估腸道炎癥程度。利用生化方法檢測(cè)血清丙二
2、醛(MDA)含量以及結(jié)腸組織中氧化型谷胱甘肽/還原型谷胱甘肽(GSSG/GSH)比率等氧化應(yīng)激指標(biāo),以評(píng)估機(jī)體氧化應(yīng)激程度。采用免疫組織化學(xué)方法和實(shí)時(shí)定量 PCR技術(shù)分別檢測(cè)小鼠結(jié)腸組織中NADPH氧化酶Nox1和Duox2蛋白及mRNA的表達(dá)情況。
結(jié)果:
1.正常組小鼠無(wú)腸炎,1.5%DSS組、3%DSS組小鼠分別呈輕度和重度腸炎:1.5%DSS組、3%DSS組 DAI評(píng)分與正常組相比均顯著增高;1.5%DSS組
3、和3%DSS組小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度均有不同程度的縮短,其中3%DSS組結(jié)腸長(zhǎng)度縮短嚴(yán)重;正常組小鼠結(jié)腸內(nèi)無(wú)血便,1.5%DSS組、3%DSS組結(jié)腸內(nèi)較正常組均有不同程度的血便;HE染色評(píng)分結(jié)果呈現(xiàn)各組炎癥程度有明顯差別。
2.氧化應(yīng)激指標(biāo)(MDA、GSSG/GSH)在1.5%DSS組升高,而3%DSS組進(jìn)一步升高。
3. NADPH氧化酶 Nox1與 Duox2蛋白和 mRNA在不同炎癥程度時(shí)表達(dá)不同:Nox1蛋白和 mRN
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