RELMβ在COPD相關(guān)肺動(dòng)脈高壓患者發(fā)病中作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究COPD相關(guān)肺動(dòng)脈高壓（pulmonary hypertension，PH）患者肺血管重塑病理過(guò)程中，抵抗素樣分子β（resistin-like moleculeβ,RELMβ）及其介導(dǎo)的信號(hào)通路PI3K／Akt／mTOR在肺小動(dòng)脈血管壁的表達(dá)情況，明確上述蛋白在肺血管重塑過(guò)程中的作用。通過(guò)檢測(cè)COPD相關(guān)PH患者血漿中RELMβ、HIF-1a蛋白表達(dá)水平探討其與肺動(dòng)脈壓力的相關(guān)性，從而為研究COPD相關(guān)PH提供新的理論依據(jù)。

2、
　　方法：實(shí)驗(yàn)共分為兩個(gè)部分。
　　第一部分收集因肺鱗癌行肺葉切除術(shù)患者的肺組織30例，通過(guò)血?dú)夥治?、肺功能、多普勒超聲心?dòng)圖將其分為非COPD非PH組（對(duì)照組）、COPD非PH組（COPD組）、COPD相關(guān)PH組（PH組）。觀察各組肺血管重塑情況，免疫組織化學(xué)染色法（IHC）檢測(cè)RELMβ蛋白在肺組織的表達(dá)部位及水平，免疫蛋白印跡（Western blot，WB）檢測(cè)RELMβ、PI3K、Akt、mTOR蛋白在患者肺小動(dòng)

3、脈血管壁上的表達(dá)情況，并探討上述蛋白在肺血管重塑過(guò)程中的作用。
　　第二部分將因 COPD急性加重而入院治療的80例患者通過(guò)血?dú)夥治觥⒎喂δ?、多普勒超聲心?dòng)圖將其分為COPD相關(guān)PH組（PH組）、COPD非PH組（COPD組），并在體檢科隨機(jī)抽取行上述檢查的健康志愿者40例為對(duì)照組，采集各觀察組患者靜脈血5ml，通過(guò)離心機(jī)分離出血漿，用ELISA法檢測(cè)各組患者血漿中Relmβ、HIF-1a蛋白表達(dá)水平并探討其與肺動(dòng)脈壓力的相關(guān)性。

4、
　　結(jié)果：
　　1、顯微鏡下觀察各組肺血管重塑
　　（1）對(duì)照組顯微鏡下可見(jiàn)肺泡結(jié)構(gòu)清晰，肺泡間隔完整，肺小動(dòng)脈管壁較薄，血管腔未見(jiàn)狹窄。
　　（2）COPD組較對(duì)照組相比，肺泡壁斷裂、融合，可見(jiàn)肺大泡形成，肺泡結(jié)構(gòu)破壞明顯，肺小動(dòng)脈血管壁增厚，血管腔狹窄明顯。COPD組肺小動(dòng)脈管壁厚度占外徑的百分比（WT％）、肺小動(dòng)脈管壁面積與血管總面積的比值（WA%）均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。而肺小動(dòng)

5、脈管腔面積與管總面積的比值（LA%）低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　?。?）PH組顯微鏡下可見(jiàn)肺大泡形成，其肺小動(dòng)脈血管中膜層顯著增厚，血管腔明顯狹窄，該組 WT%、WA%、LA%較 COPD組比較，差異均存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　2、免疫組織化學(xué)檢測(cè)各組肺小動(dòng)脈血管壁RELMβ表達(dá)
　　免疫組織化學(xué)染色法結(jié)果顯示：COPD組與對(duì)照組相比，RELMβ表達(dá)明顯增強(qiáng)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

6、<0.05）；PH組則呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，與COPD組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　3、Western blot檢測(cè)各組患者肺組織內(nèi)RELMβ、PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路蛋白表達(dá)
　　Western blot結(jié)果顯示：Relmβ在COPD組表達(dá)量顯著高于對(duì)照組，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；PH組Relmβ蛋白表達(dá)量高于COPD
　　組，結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；p-PI3K在COPD組表

7、達(dá)量顯著高于對(duì)照組，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；p-PI3K在PH組表達(dá)量顯著高于COPD組，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；p-Akt308在COPD組表達(dá)量明顯高于對(duì)照組，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；Akt308在PH組表達(dá)量明顯高于COPD組，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；p-Akt473在 COPD組表達(dá)量明顯高于對(duì)照組，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；p-Akt473在PH組表達(dá)量明顯高于COPD

8、組，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；p-mTOR在COPD組表達(dá)量明顯高于對(duì)照組，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；p-mTOR在PH組表達(dá)量明顯高于COPD組，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　直線相關(guān)分析顯示，患者肺組織內(nèi)Relmβ蛋白與WT%、WA%、PASP呈正相關(guān)，與LA%、動(dòng)脈血氧分壓(PaO2)呈負(fù)相關(guān)。
　　4、ELISA檢測(cè)各組患者血漿中Relmβ、HIF-1a表達(dá)
　　COPD組患者血

9、漿中Relmβ表達(dá)量與對(duì)照組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；PH組患者血漿中Relmβ表達(dá)量與COPD組相比，具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）；COPD組患者血漿中HIF-1a表達(dá)量與對(duì)照組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；COPD組患者血漿中HIF-1a表達(dá)量與PH組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　直線相關(guān)分析顯示，患者血漿中RELMβ蛋白表達(dá)與PASP、HIF-1a呈正相關(guān)，與PaO2呈負(fù)相