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1、本實(shí)驗(yàn)對(duì)615株海洋微生物以茄鏈格孢菌為靶標(biāo)菌進(jìn)行抑菌篩選,選取兩株抑菌活性強(qiáng)海洋芽孢桿菌,研究其分類(lèi)鑒定和農(nóng)藥活性,測(cè)試對(duì)植物的促生作用和有關(guān)控制基因,及主要生防基因與對(duì)番茄葉霉病和油菜菌核病的防治,獲得結(jié)果如下:
(1)以茄鏈格孢菌為靶標(biāo)菌,通過(guò)96孔板法,測(cè)得C12-6和Zl0-3菌株的MIC值分別為為1和2μl/ml;抑菌譜試驗(yàn)表明,Z10-3菌株對(duì)供試的8種植物病原真菌的抑菌率為74.1%-85.4%;C12-6為6
2、3.1%-83%。抑菌作用強(qiáng),抑菌譜廣。利用特異性引物PCR擴(kuò)增結(jié)果表明,C12-6和Z10-3菌株基因組中存在與抑菌活性有密切關(guān)系的ituC,enD,srfAA,srfAB,bioA,bmyB的基因簇片段;盆栽實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,Z10-3菌株對(duì)番茄葉霉病和油菜菌核病的防效為62.1%和63.6%;C12-6菌株對(duì)番茄葉霉病和油菜菌核病的防效達(dá)到59.1%和65.4%。
(2)C12-6和Z10-3菌株具有相關(guān)促生基因,如合成IA
3、A的關(guān)鍵基因ysnE和yhcX基因,編碼合成固氮還原酶的nifH基因簇; Z10-3菌株還存在合成植酸酶關(guān)鍵基因phy片段;編碼合成增強(qiáng)植物抗逆性物質(zhì)2,3-丁二醇的關(guān)鍵基因alsS,alsD,alsR基因簇片段。C12-6和Z10-3菌株都具有固氮作用,產(chǎn)IAA測(cè)試均為陽(yáng)性,產(chǎn)鐵載體活性分別為28.9%和68.7%,均可降解無(wú)機(jī)磷,Z10-3菌株還能利用無(wú)機(jī)鉀。
番茄定殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,C12-6和Z10-3菌株可在番茄的根,
4、莖和葉定殖。Z10-3在根內(nèi)的定殖最大量60×105cfu/g,15d后降至18×106cfu/g; C12-6菌株從60×106cfu/g下降到15×106cfu/g。在鹽漬土壤C12-6和Z10-3菌株能較好的保持番茄葉綠素,葉綠素含量分別比對(duì)照提高了53.4%和57.4%。
(3)通過(guò)生理生化特性和16S rDNA、gyrB基因分析,將Z10-3和C12-6分別鑒定為解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amylolique
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