凝膠制劑質(zhì)量控制與質(zhì)量表征關(guān)鍵技術(shù)的研究.pdf

1、凝膠制劑是近年來(lái)新興的一種藥物新劑型，由于其具有良好的生物相容性，局部給藥后具有吸收好、穩(wěn)定性較好、不污染衣物，對(duì)藥物釋放具有控釋、緩釋作用等特點(diǎn)，并得到廣泛的應(yīng)用。為保證藥物的安全性和有效性，關(guān)鍵在于質(zhì)量控制的研究。由于凝膠制劑在制備過(guò)程中會(huì)使用大量的高分子藥用輔料，其存在不僅干擾小分子活性物質(zhì)的分析測(cè)定，而且增加了其質(zhì)量表征的困難性。因此，樣品前處理工作中表征凝膠劑中的小分子活性物質(zhì)的含量是的一個(gè)急待解決的難題并引起眾多研究者的關(guān)注

2、，并為些做出的較多的嘗試。
　　目前，凝膠制劑的樣品前處理方法主要包括凝膠滲透法、有機(jī)溶劑提取法和離心沉淀法。然而這些方法操作過(guò)程耗時(shí)而且繁瑣，但分離效果并不理想，分析的準(zhǔn)確性和可靠性也不高。超濾法是目前通常使用的樣品前處理手段，其主要是在壓力的作用下，截留大分子，使小分子通過(guò)超濾膜，從而實(shí)現(xiàn)大分子和小分子物質(zhì)的分離。傳統(tǒng)的超濾法采用的都是平膜過(guò)濾，在離心超濾過(guò)程中易產(chǎn)生濃差極化現(xiàn)象，進(jìn)而導(dǎo)致膜滲流量和分離效率降低，影響分析的準(zhǔn)確

3、度。中空纖維超濾法(HFCF-UF)是一種新型的超濾技術(shù)，其克服了傳統(tǒng)超濾法的濃差極化現(xiàn)象，大大提高了分離效率。HFCF-UF已經(jīng)成功的應(yīng)用于藥物制劑和生物體液中小分子活性物質(zhì)的分離，展現(xiàn)了其在復(fù)雜基質(zhì)中分離小分子物質(zhì)的前景，然而在凝膠這種復(fù)雜機(jī)制中的應(yīng)用未見(jiàn)報(bào)道。
　　為了保證凝膠制劑中有效成分的準(zhǔn)確定量，研究和開(kāi)發(fā)一種簡(jiǎn)單、適宜其日常質(zhì)量控制的前處理方法是研究者面臨的重要課題，也是保證凝膠制劑未來(lái)開(kāi)發(fā)與應(yīng)用的關(guān)鍵問(wèn)題。

4、　　本課題以酮洛芬凝膠和氧氟沙星凝膠為代表，通過(guò)考察中空纖維對(duì)藥物的吸附性和凝膠制劑稀釋劑的選擇，對(duì)凝膠制劑質(zhì)量控制與質(zhì)量表征關(guān)鍵技術(shù)的研究。研究結(jié)果表明HFCF-UF前處理方法用于凝膠制劑中小分子物質(zhì)的分析，具有高效、簡(jiǎn)便、快速的優(yōu)點(diǎn)，克服了傳統(tǒng)方法的操作繁瑣、分離效果不理想等缺點(diǎn)，為含有高分子輔料的凝膠制劑中小分子的表征提供了一個(gè)可靠的分析平臺(tái)。
　　第一部分中空纖維超濾法-高效液相色譜法測(cè)定酮洛芬凝膠中主藥的含量
　　

5、目的:考察不同中空纖維膜對(duì)酮洛芬的吸附情況和酮洛芬凝膠稀釋劑的選擇，建立了利用中空纖維超濾技術(shù)進(jìn)行凝膠類制劑的樣品前處理方法，并結(jié)合高效液相色譜法對(duì)酮洛芬凝膠中主藥的含量進(jìn)行分析。
　　方法:首先選取了兩種不同膜材（聚偏氟乙烯、聚砜）進(jìn)行吸附性考察。在進(jìn)行凝膠稀釋劑（水、甲醇）的選擇，建立了HFCF-UF對(duì)樣品的分離純化方法，分離純化條件:取適量供試品溶液約9 mL于HFCF-UF裝置中，在4000 r/min離心15 min，取

6、出中空纖維，收集腔內(nèi)溶液，直接進(jìn)行高效液相色譜法分析。色譜條件:phenomenexc(@)C18柱(250×4.60 mm);流動(dòng)相:0.05 mol·L-1磷酸二氫鉀溶液（用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.5）∶甲醇=(25∶75);流速:1.0 mL·min-1;柱溫為室溫;檢測(cè)波長(zhǎng):255 nm;進(jìn)樣量:20μL。
　　結(jié)果:凝膠樣品在經(jīng)過(guò)HFCF-UF裝置中，能將小分子活性成分與高分子輔料有效分離，離心后的濾液可直接進(jìn)行色譜分析。采

7、用2種中空纖維膜均可獲得滿意的回收率結(jié)果，對(duì)酮洛芬無(wú)吸附作用。采用甲醇作為稀釋劑時(shí)回收率達(dá)100％。方法研究結(jié)果表明，酮洛芬在0.26-10.2μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好;酮洛芬平均回收率分別為:101.1％(RSD=1.3％)，102.6％(RSD=1.5％)，100.8％(RSD=1.6％);外標(biāo)法計(jì)算樣品中酮洛芬含量分別為樣品標(biāo)示量的100.5％、99.8％、99.7％。
　　結(jié)論:HFCF-UF用于酮洛芬凝膠前處理，

8、獲得超濾液可直接進(jìn)行分析。該法具有高效、簡(jiǎn)便、快速，克服了傳統(tǒng)方法的操作繁瑣、分離效果不理想等缺點(diǎn)，為含有高分子輔料的凝膠制劑中小分子的表征提供了一個(gè)可靠的分析平臺(tái)。
　　第二部分中空纖維超濾法-高效液相色譜法測(cè)定氧氟沙星凝膠中主藥的含量
　　目的:考察凝膠樣品濃度對(duì)氧氟沙星回收率的影響、中空纖維膜對(duì)氧氟沙星的吸附情況和凝膠稀釋劑的選擇，建立了利用中空纖維超濾技術(shù)進(jìn)行凝膠類制劑的樣品前處理方法，并結(jié)合高效液相色譜法方法對(duì)氧氟

9、沙星凝膠中主藥的含量進(jìn)行分析。
　　方法:首先選取了兩種不同膜材（聚偏氟乙烯、聚砜）進(jìn)行吸附性考察。用水稀釋至刻度，制備不同濃度凝膠供試品。采用HFCF-UF對(duì)樣品經(jīng)行分離純化，分離純化條件:HFCF-UF裝置在4000 r/min離心15 min，取出中空纖維，棄去第一次超濾液后，將中空纖維再次放入樣品溶液中進(jìn)行二次超濾，收集腔內(nèi)溶液，用流動(dòng)相稀釋適當(dāng)倍數(shù)，直接進(jìn)行高效液相色譜法分析。色譜條件:Promosil C18柱(150

10、×4.60 mm);流動(dòng)相:甲醇∶水=(30∶70，含0.5％的三乙胺，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至4.0);流速:1.0 mL·min-1;柱溫為室溫;檢測(cè)波長(zhǎng):293 nm;進(jìn)樣量:20μL。
　　結(jié)果:利用中空纖維超濾技術(shù)，可有效分離出氧氟沙星凝膠中小分子活性成分，濾液可直接進(jìn)行色譜分析。高濃度凝膠樣品對(duì)回收率影響較小，加大樣品量，盡量減少對(duì)樣品的稀釋作用，避免了樣品失真對(duì)回收率的影響。2種中空纖維都存在吸附問(wèn)題，通過(guò)二次超濾法以達(dá)到

11、膜吸附飽和解決了中空纖維膜的吸附問(wèn)題，回收率滿足要求。氧氟沙星在5.10-51.0μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好;氧氟沙星平均回收率分別為:101.1％(RSD=1.7％)，9.9％(RSD=0.8％)，100.3％(RSD=0.9％);外標(biāo)法計(jì)算樣品中氧氟沙星含量分別為樣品標(biāo)示量的101.5％、100.4％、99.6％。
　　結(jié)論:HFCF-UF用于氧氟沙星凝膠前處理，獲得的二次超濾液可直接進(jìn)行分析。該法具有高效、簡(jiǎn)便、快速，