基因組挖掘指導(dǎo)下費(fèi)希新薩托菌代謝產(chǎn)物定向分離與活性評(píng)價(jià)研究.pdf

1、微生物次級(jí)代謝產(chǎn)物一直是藥物先導(dǎo)化合物發(fā)現(xiàn)和創(chuàng)新藥物研制的重要來源。如何經(jīng)濟(jì)快速地獲得結(jié)構(gòu)新穎的活性微生物天然產(chǎn)物已成為當(dāng)今微生物天然產(chǎn)物研究與開發(fā)中的重點(diǎn)與熱點(diǎn)。Neosartoryafischeri NRRL181是一株已完成全基因測(cè)序的真菌。通過生物信息學(xué)的分析可知該菌具有豐富的次級(jí)代謝產(chǎn)物生物合成基因簇，其代謝產(chǎn)物類型遠(yuǎn)超過現(xiàn)有從該菌獲得的化合物類型。
　　本文第一章綜述了基因組挖掘指導(dǎo)定向分離以及N.fischeriNR

2、RL181次級(jí)代謝產(chǎn)物的相關(guān)研究。第二章通過生物信息學(xué)分析預(yù)測(cè)了該菌十余類可能的次級(jí)代謝產(chǎn)物及其結(jié)構(gòu)，第三章通過菌種小試篩選了近百種培養(yǎng)基，依據(jù)各類預(yù)測(cè)化合物的結(jié)構(gòu)特征，在HPLC-DAD與UPLC-MS等儀器的指引下來尋找合適培養(yǎng)基。本文第四章選定了4種合適培養(yǎng)基進(jìn)行了大規(guī)模發(fā)酵，并依據(jù)各類化合物的結(jié)構(gòu)特征定向分離得到了cottoquinazolines、pyripyropenes、aszonalenins、aszonapyrones

3、、fumitremorgins、gliotoxins等類型預(yù)測(cè)產(chǎn)物，共計(jì)35個(gè)，其中還包括了4個(gè)新化合物。
　　本文第五章根據(jù)基因簇中“自抵抗基因”提供的信息，對(duì)部分化合物進(jìn)行了定向活性評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)了數(shù)個(gè)活性極強(qiáng)的α-葡萄糖苷酶抑制劑，活性最強(qiáng)的的化合物4活性達(dá)到了陽性藥阿卡波糖的11.7倍。作用機(jī)制研究表明該類化合物與現(xiàn)有上市的α-葡萄糖苷酶抑制劑具有不同的作用機(jī)制，為一類新型的α-葡萄糖苷酶抑制劑。本論文研究表明，與傳統(tǒng)的分離方