血漿一氧化氮與動(dòng)脈粥樣硬化損傷機(jī)制的研究及普羅布考對(duì)其的影響.pdf

1、目的:動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病是一種由多種危險(xiǎn)因素互相影響的復(fù)雜疾病。高膽固醇飼料(HCD)能夠誘導(dǎo)家兔動(dòng)脈粥樣硬化和高脂血癥，分析家兔血漿一氧化氮(NO)水平與動(dòng)脈粥樣硬化損傷之間的關(guān)系。并通過(guò)體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，闡明NO在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中的分子機(jī)制，并闡明普羅布考(PB)在這一過(guò)程中的藥理作用。
　　方法:(1)20只雄性日本大耳白家兔隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，對(duì)照組飼喂正常飼料，實(shí)驗(yàn)組飼喂HCD，16周后，檢測(cè)血脂水平，

2、分離主動(dòng)脈樹(shù)，蘇丹Ⅳ染色，分析動(dòng)脈粥樣硬化斑塊面積。蘇木精伊紅染色、范吉爾森彈性纖維染色以及免疫組織化學(xué)染色方法分析主動(dòng)脈弓部斑塊的組織學(xué)特征，檢測(cè)血漿NO水平，并將其與動(dòng)脈粥樣硬化斑塊面積大小以及斑塊中巨噬細(xì)胞的表達(dá)量進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　(2)體外實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)巨噬細(xì)胞RAW264.7，用ox-LDL進(jìn)行刺激，PB進(jìn)行干預(yù)，分別檢測(cè)細(xì)胞上清NO水平，RT-PCR法測(cè)定巨噬細(xì)胞中誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA水平的表達(dá)，Wes

3、tern Blotting法測(cè)定iNOS蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果:(1)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)部分，與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組家兔血漿總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇及NO水平均顯著升高;實(shí)驗(yàn)組家兔主動(dòng)脈血管內(nèi)壁出現(xiàn)大量動(dòng)脈粥樣硬化斑塊;動(dòng)脈粥樣硬化斑塊面積大小及斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞表達(dá)量與血漿NO水平呈正相關(guān)。
　　(2)體外實(shí)驗(yàn)部分，與對(duì)照組相比，隨著ox-LDL刺激濃度的上升，細(xì)胞上清中的NO水平呈劑量依賴(lài)性，iNOS mRNA的表達(dá)水平也

4、逐漸增加，iNOS蛋白的表達(dá)水平也有所增加，而當(dāng)加入PB后，這些現(xiàn)象均會(huì)出現(xiàn)不同程度的逆轉(zhuǎn)。
　　結(jié)論:(1)在HCD誘導(dǎo)的家兔動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中，斑塊面積大小及斑塊中巨噬細(xì)胞表達(dá)量均與血漿NO有相關(guān)性。這提示血漿NO水平可能與動(dòng)脈粥樣硬化初期發(fā)生和發(fā)展相關(guān)。
　　(2)NO水平的上升與動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中巨噬細(xì)胞的表達(dá)有關(guān)，其作用機(jī)制可能與巨噬細(xì)胞中的iNOS基因被激活有關(guān)。
　　(3)PB作為治療動(dòng)脈粥硬化的藥物，其