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1、目的:此研究通過形成wistar大鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型,以阿托伐他汀鈣、胱硫醚-g-裂解酶(CSE)抑制劑DL-炔丙基甘氨酸(PPG)和內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)抑制劑 N'-硝基-L-精氨酸甲酯鹽酸鹽(L-NAME)對(duì)其進(jìn)行干預(yù),使用大鼠主動(dòng)脈弓病理切片和血脂水平評(píng)價(jià)動(dòng)脈粥樣硬化的病變程度,觀察大鼠動(dòng)脈粥樣硬化病變時(shí)血清一氧化氮(NO)和硫化氫(H2S)體系的變化,觀察阿托伐他汀鈣干預(yù)對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化病變大鼠NO和H2S體系的影響,首
2、次探索H2S通路被阻斷后對(duì)阿托伐他汀鈣抗動(dòng)脈粥樣硬化作用的影響,研究 NO通路被阻斷后對(duì)阿托伐他汀鈣抗動(dòng)脈粥樣硬化作用的影響,以及觀察NO體系與H2S體系在阿托伐他汀鈣抗動(dòng)脈粥樣硬化過程中的相互影響。
方法:清潔級(jí)健康雄性wistar大鼠60只,質(zhì)量181~219g,按體重隨機(jī)分為五組:正常對(duì)照組(Control組,n=12),高脂飲食組(HF組,n=12),高脂飲食+阿托伐他汀鈣組(HF+ATV組,n=12),高脂飲食+阿托
3、伐他汀鈣+PPG組(HF+ATV+PPG組,n=12),高脂飲食+阿托伐他汀鈣+ L-NAME組(HF+ATV+ L-NAME組,n=12)??傦曫B(yǎng)周期為12周。Control組持續(xù)喂養(yǎng)普通大鼠飼料;HF組、HF+ATV組、HF+ATV+PPG組和HF+ATV+L-NAME組持續(xù)喂養(yǎng)高脂飼料,并分別在第1,5,9周初腹腔注射維生素D370萬IU/kg;Control組、HF組在第9~12周0.9%生理鹽水1~2.5ml/day灌胃,0.
4、9%生理鹽水0.2~0.5ml/day腹腔注射;HF+ATV組在第9~12周阿托伐他汀鈣5mg/kg/day灌胃,0.9%生理鹽水0.2~0.5ml/day腹腔注射;HF+ATV+PPG組在第9~12周阿托伐他汀鈣5mg/kg/day灌胃,PPG37.5mg/kg/day腹腔注射;HF+ATV+L-NAME組在第9~12周阿托伐他汀鈣5mg/kg/day灌胃,L-NAME15mg/kg/day腹腔注射。在第12周末心臟采血,留取主動(dòng)脈弓
5、和降主動(dòng)脈標(biāo)本。用全自動(dòng)生化分析儀作血脂分析,取主動(dòng)脈弓作HE染色,測(cè)定血清NO含量,血清總一氧化氮合酶(T-NOS)活力,用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)法檢測(cè)血清e(cuò)NOS,血清H2S和血清CSE含量,用半定量RT-PCR法檢測(cè)降主動(dòng)脈eNOSmRNA和CSEmRNA表達(dá)水平。
結(jié)果:與Control組相比,HF組血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)明顯升高(P<0.05),主動(dòng)脈形成典型
6、動(dòng)脈粥樣硬化病變,血清NO、eNOS含量和降主動(dòng)脈eNOSmRNA表達(dá)水平明顯降低(P<0.05),T-NOS活力下降(P<0.05),血清H2S、CSE含量和降主動(dòng)脈CSEmRNA表達(dá)水平明顯降低(P<0.05)。與HF組比較,HF+ATV組血清TC和LDL-C含量明顯下降(P<0.05),主動(dòng)脈粥樣硬化病變較輕,血清NO、eNOS含量和降主動(dòng)脈eNOSmRNA表達(dá)水平明顯升高(P<0.05),血清H2S和CSE含量無顯著改變(P>0
7、.05)。HF+ATV+PPG組較HF+ATV組血脂水平無顯著變化(P>0.05),血清H2S和CSE含量明顯下降(P<0.05),而血清NO、eNOS含量和降主動(dòng)脈 eNOSmRNA表達(dá)水平則明顯增加( P<0.05)。HF+ATV+L-NAME組較HF+ATV組血清TC和LDL-C明顯升高(P<0.05),血清NO、eNOS含量和T-NOS活力下降(P<0.05),而血清H2S、CSE含量和和降主動(dòng)脈CSEmRNA表達(dá)水平則明顯升高
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