不同劑量阿托伐他汀抗動(dòng)脈粥樣硬化作用的研究.pdf

1、目的：動(dòng)脈粥樣硬化(AS)所致的臨床心腦缺血性事件是中老年人群的常見病、多發(fā)病，有較高的致殘率和致死率。同時(shí)造成心腦缺血事件發(fā)生的主要原因也是由于動(dòng)脈粥樣硬化性血栓的形成及不穩(wěn)定粥樣斑塊破裂引發(fā)。因此，延緩和阻止AS的進(jìn)展就成為防治心腦缺血性事件的主要措施。而AS作為慢性炎性病變，其形成、發(fā)展以及斑塊破裂的過程均與炎性反應(yīng)密切相關(guān)。他汀類藥物除有效降脂外，尚具有獨(dú)立于降脂作用外的抗炎和穩(wěn)定斑塊的作用，能有效地干預(yù)AS的進(jìn)展從而防治缺血事

2、件的發(fā)生。然而，目前有關(guān)他汀類藥物抗AS的作用機(jī)制及抗AS的療效與劑量的相關(guān)性的研究尚無一致的結(jié)論，國(guó)外動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中所采用他汀類藥物的抗炎劑量多為20～40mg/kg·d，甚至更大,無論從經(jīng)濟(jì)利益以及藥物副作用考慮，均難以被國(guó)內(nèi)患者所接受。因此，本實(shí)驗(yàn)以動(dòng)脈粥樣硬化大鼠作為研究對(duì)象，在接受不同劑量阿托伐他汀干預(yù)治療后，利用分子生物學(xué)技術(shù)，分別檢測(cè)大鼠動(dòng)脈組織中炎性因子既細(xì)胞內(nèi)黏附分子-1(ICAM-1)、基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2

3、)、組織金屬蛋白酶抑制劑-1(TIMP-1)mRNA的表達(dá)，以探討阿托伐他汀抗AS的機(jī)制和有效抗炎劑量，為AS的防治提供可靠的理論依據(jù)。 方法：將40只體重約200±20g的Wistar大鼠(鼠齡6周)適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為5組：對(duì)照組(A組，n=8)；動(dòng)脈粥樣硬化模型組(B組，n=8)；三種不同劑量的阿托伐他汀干預(yù)組(C1、C2、C3組，每組n=8)：C1組(予阿托伐他汀2.5mg/kg·d灌胃)，C2組(予阿托伐他汀5m

4、g/kg·d灌胃)，C3組(予阿托伐他汀10mg/kg·d灌胃)。A組喂食基礎(chǔ)飼料；B組喂食高脂飼料(內(nèi)含3％膽固醇、0.5％膽酸鈉、0.2％丙基硫氧嘧啶、5％白糖、10％豬油、81.3％基礎(chǔ)飼料)制備AS大鼠模型；C1、C2、C3組在喂食高脂飼料完成AS模型后分別予以不同劑量阿托伐他汀干預(yù)治療。 AS大鼠的制備和干預(yù)治療方法：在喂食高脂飼料開始時(shí)B組和C1、C2、C3組大鼠每只一次性腹腔注射維生素D360萬IU/kg，而A組大

5、鼠腹腔注射同等體積的生理鹽水。從實(shí)驗(yàn)第8周末，C1、C2、C3組大鼠分別以容有不同劑量阿托伐他汀的生理鹽水(分別為2.5mg/kg·d、5mg/kg·d、10mg/kg·d)灌胃，A組和B組大鼠給予相同體積的生理鹽水灌胃。干預(yù)治療過程共6周。整個(gè)試驗(yàn)持續(xù)14周。 AS形態(tài)及炎性指標(biāo)的檢測(cè)方法：在實(shí)驗(yàn)的第14周末，將Wistar大鼠以10％的水合氯醛(0.2-0.4ml/100g)腹腔注射麻醉后打開胸腔，于心臟取血，用于測(cè)定血清甘

6、油三脂(TG)、血清膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、極低密度脂蛋白膽固醇(VLDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平。取大鼠的主動(dòng)脈組織進(jìn)行蘇木素-伊紅(HE)染色，觀察動(dòng)脈形態(tài)和病理改變。應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)大鼠動(dòng)脈組織中MMP-2、TIMP-1、ICAM-1mRNA的表達(dá)。利用凝膠圖像分析系統(tǒng)對(duì)PCR產(chǎn)物電泳條帶進(jìn)行吸光度定量，并根據(jù)各條帶與β-actin吸光度的比值進(jìn)行半定量統(tǒng)計(jì)。

7、統(tǒng)計(jì)方法：使用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件包處理數(shù)據(jù)，所有數(shù)據(jù)以(x)±s表示，檢驗(yàn)水準(zhǔn)定為0.05。 結(jié)論： 1.在AS大鼠的動(dòng)脈組織中，炎性因子ICAM-1、MMP2的表達(dá)明顯增高，且MMP2/TIMP-1的比值失衡，表明上述炎性指標(biāo)參與了AS的形成過程。所以，抗炎治療有利于防治動(dòng)脈粥樣硬化，近而對(duì)心腦缺血事件的發(fā)生也具有一定防治作用。 2.阿托伐他汀抗動(dòng)脈粥樣硬化的機(jī)制除有降脂作用外，尚具有不依賴于降脂作用的抗