阿托伐他汀及聯(lián)合普羅布考對(duì)載脂蛋白E基因敲除小鼠動(dòng)脈粥樣硬化的作用.pdf

1、目的：探討阿托伐他汀單獨(dú)應(yīng)用及聯(lián)合普羅布考應(yīng)用時(shí)對(duì)載脂蛋白E基因敲除（lipoprotein E gene knock-out，ApoE-/-）小鼠動(dòng)脈系統(tǒng)粥樣硬化病變的作用。
　　方法：使用ApoE-/-小鼠，通過(guò)喂養(yǎng)高脂飼料加速小鼠的動(dòng)脈粥樣硬化病變過(guò)程。模擬人類(lèi)動(dòng)脈粥樣硬化病變形成過(guò)程，之后模擬人類(lèi)藥物治療過(guò)程，高脂喂養(yǎng)10周造模成功后給予阿托伐他汀（劑量為10mg/kg/d）和聯(lián)合給予普羅布考（0.5％藥物飼料）進(jìn)行治療性

2、干預(yù)。27只小鼠隨機(jī)分為5組：對(duì)照組(control group n=6)，給予普通飼料喂養(yǎng)，10周后麻醉處死取標(biāo)本；模型組（model group n=6），給予高脂飼料喂養(yǎng)，10周后麻醉處死取標(biāo)本；空白組(blank group n=5)，給予高脂喂養(yǎng)，10周后開(kāi)始給予每只小鼠灌胃超純水0.3ml/只/d；阿托伐他汀組（atorvastatin group n=5)，給予高脂喂養(yǎng)，喂養(yǎng)10周后，每只小鼠灌胃藥物阿托伐他?。▌┝繛?0

3、mg/Kg/d）；阿托伐他汀聯(lián)合普羅布考組(combination group n=5)，高脂喂養(yǎng)，10周后換藥物飼料（含有0.5%普羅布考）喂養(yǎng)，同時(shí)每只小鼠仍予藥物阿托伐他汀灌胃（劑量為10mg/Kg/d）。20周（干預(yù)10周）后，處死所有小鼠，檢測(cè)小鼠血脂水平、ELISA檢測(cè)ox-LDL，動(dòng)脈標(biāo)本進(jìn)行組織學(xué)觀察(HE染色，油紅O染色，天狼星紅染色，彈力纖維染色)、免疫組化分析（MOMA-2,α-actin）、免疫印跡分析（MMP-

4、9,MCP-1）。
　　結(jié)果：①每組小鼠在喂養(yǎng)10周后體重均有明顯增長(zhǎng)（P<0.05），3組干預(yù)組的小鼠繼續(xù)喂養(yǎng)至20周時(shí)的體重均有明顯增長(zhǎng)（P<0.05）。對(duì)照組和模型組小鼠喂養(yǎng)10周后的體重變化量之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），3組干預(yù)組的小鼠給予干預(yù)前后的體重差異也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。②血液學(xué)檢測(cè)中血清總膽固醇、甘油三酯及氧化低密度脂蛋白水平模型組小鼠都高于對(duì)照組小鼠（P<0.05）。阿托伐他汀組及阿托伐他汀

5、與普羅布考聯(lián)合組小鼠血清總膽固醇、氧化低密度脂蛋白水平均低于空白組（P<0.05），聯(lián)合組小鼠血清氧化低密度脂蛋白明顯低于阿托伐他汀組小鼠（P<0.05），甘油三酯水平三組干預(yù)組之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。③阿托伐他汀組小鼠病損處平滑肌細(xì)胞含量高于空白對(duì)照組（P<0.05）；阿托伐他汀聯(lián)合普羅布考組小鼠動(dòng)脈粥樣硬化病損處脂質(zhì)、巨噬細(xì)胞含量明顯低于空白對(duì)照組，平滑肌含量高于空白對(duì)照組（P<0.05）。④干預(yù)組中三組小鼠動(dòng)脈粥樣

6、硬化病損處MMP-9和MCP-1蛋白表達(dá)量均有差異（P<0.05）。給予阿托伐他汀干預(yù)和聯(lián)合用藥組小鼠動(dòng)脈MMP-9的蛋白表達(dá)量均小于空白干預(yù)的小鼠（P<0.05），但單獨(dú)應(yīng)用阿托伐他汀和聯(lián)合用藥組之間差異無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。聯(lián)合用藥組小鼠動(dòng)脈MCP-1蛋白表達(dá)量明顯小于空白干預(yù)和阿托伐他汀干預(yù)的小鼠（P<0.05），但阿托伐他汀干預(yù)和空白干預(yù)的小鼠之間MCP-1的蛋白表達(dá)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　結(jié)

7、論：⑴高脂飼料飼養(yǎng) ApoE-/-小鼠血脂水平升高，可以形成更明顯的動(dòng)脈粥樣硬化病變，且病變形成所需時(shí)間更短，因此，高脂飼料飼養(yǎng) ApoE-/-小鼠是動(dòng)脈粥樣硬化的理想模型。⑵阿托伐他汀能夠使形成動(dòng)脈粥樣硬化病變的 ApoE-/-小鼠中血清總膽固醇、氧化低密度脂蛋白水平下降，同時(shí)給予普羅布考可加強(qiáng)該作用。⑶阿托伐他汀可以增加 ApoE-/-小鼠動(dòng)脈粥樣硬化病變處的平滑肌細(xì)胞含量，起到抗動(dòng)脈粥樣硬化，穩(wěn)定斑塊的作用。普羅布考與之聯(lián)合應(yīng)用不