2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  研究廣譜抗生素、化療藥物及外源真菌對(duì)ICR小鼠腸黏膜機(jī)械屏障、生物屏障和免疫屏障的影響作用。
  方法:
  1.實(shí)驗(yàn)處理:64只6周齡ICR雌性小鼠隨機(jī)分為8組,每組8只。分組設(shè)置為A組:無處理對(duì)照組;B組:單純使用廣譜抗生素溶液組(1mg/ml鹽酸萬古霉素、1mg/ml鹽酸克林霉素和0.2mg/ml硫酸慶大霉素混合溶液,口服;共18天);C組:單純使用化療藥物組(實(shí)驗(yàn)第8天時(shí),200mg/kg5-氟尿嘧

2、啶,尾靜脈注射,一次);D組:單純白色念珠菌灌胃組(實(shí)驗(yàn)第9、10兩天分別給予1×109/ml白色念珠菌懸液灌胃0.3ml,共兩次);E組:使用抗生素及化療藥物組(抗生素使用同B組,化療藥物使用同C組);F組:使用抗生素并白色念珠菌灌胃組(抗生素使用同B組,白色念珠菌灌胃同D組);G組:使用化療藥物并白色念珠菌灌胃組(化療藥物使用同C組,白色念珠菌灌胃同D組);H組:使用抗生素及化療藥物并白色念珠菌灌胃組(抗生素使用同B組,化療藥物使用

3、同C組,白色念珠菌灌胃同D組)。
  2.觀測指標(biāo):在處理過程中收集各組小鼠不同階段的糞便顆粒進(jìn)行涂片革蘭染色觀察菌群大致結(jié)構(gòu);并對(duì)給予白色念珠菌灌胃組小鼠(D、F、G、H組)的糞便進(jìn)行白色念珠菌培養(yǎng)計(jì)數(shù),研究四組小鼠腸道內(nèi)白色念珠菌含量的變化。記錄小鼠在0天(開始階段)、7天(抗生素飲用處理后)、10天(白色念珠茵灌胃處理后)和18天(處死前)的體重,并全程記錄不同組小鼠死亡情況;在實(shí)驗(yàn)第18天時(shí)處死全部組小鼠,分別對(duì)各組小鼠肺

4、、肝、腎進(jìn)行研磨勻漿,對(duì)勻漿中主要細(xì)菌和白色念珠菌進(jìn)行菌落培養(yǎng)計(jì)數(shù),比較各組小鼠細(xì)菌和真菌感染率;對(duì)臟器切片行蘇木精—伊紅染色法(HE)染色,觀察感染組小鼠各臟器的病理變化;采集處死后各組小鼠盲腸糞便,提取糞便全基因組DNA,利用qPCR法對(duì)腸道中總細(xì)菌、腸桿菌屬、雙歧桿菌屬、腸球菌屬、總真菌含量進(jìn)行定量并對(duì)B/E值進(jìn)行比較分析;采集處死時(shí)小鼠外周血,ELISA法檢測血清中主要細(xì)胞因子水平(IL-4、IL-10、IL-17、TNF-α、

5、IFN-γ),并研究其在不同組別之間的差異。
  結(jié)果:
  1.實(shí)驗(yàn)第7天時(shí),各組小鼠體重均有所增加;第10天時(shí)E組和H組小鼠體重有較為明顯的下降,其他組小鼠體重變化不大;第18天時(shí)E組、G組和H組體重最低,并有不同數(shù)量的小鼠死亡,其中H組小鼠的生存率最低,為50%。
  2.給予廣譜抗生素處理的B、E、F、H組在第7天時(shí),糞便菌群數(shù)量和多樣性較對(duì)照組明顯減少,僅有少量的革蘭陰性桿菌/球菌,革蘭陽性菌少見或未見。單獨(dú)

6、給予化療處理的C組小鼠糞便菌群無明顯改變;而給予抗生素及化療處理的E組小鼠糞便涂片顯示在革蘭陽性桿菌數(shù)量明顯減少的同時(shí),出現(xiàn)革蘭陽性球菌增多的現(xiàn)象。
  3.給予白色念珠菌灌胃處理的D、F、G、H組糞便菌群在白念灌胃后第2天開始出現(xiàn)大量酵母菌,部分酵母菌呈現(xiàn)菌絲型。灌胃3-7天以后各組小鼠糞便中白色念珠菌數(shù)量呈現(xiàn)逐漸減少的趨勢,但H組小鼠在灌胃后的幾天糞便中仍維持較高載量(250.5×104 CFU/ml)的白色念珠菌。
 

7、 4.E組、G組和H組臟器培養(yǎng)結(jié)果顯示小鼠發(fā)生了腸源性臟器細(xì)菌感染,多數(shù)臟器細(xì)菌載量均達(dá)到104CFU/g數(shù)量級(jí)以上。而H組小鼠臟器同時(shí)有真菌感染,白色念珠菌載量介于103~104CFU/g之間。
  5.小鼠臟器病理切片HE染色顯示:感染組小鼠(E、G、H組)臟器均出現(xiàn)了一定程度的病理改變:肺間質(zhì)大量炎癥細(xì)胞浸潤,肺泡體積被擠壓變小;肝細(xì)胞水腫氣球樣變,肝竇受壓變窄,肝中央靜脈血流發(fā)現(xiàn)白色念珠菌胞體;腎小球體積變大,毛細(xì)血管腔狹

8、窄甚至閉塞,腎血管內(nèi)也有白色念珠菌胞體可見;大腸和盲腸均出現(xiàn)明顯的腸黏膜細(xì)胞脫落壞死,腸黏膜間隙變大,杯狀細(xì)胞減少,黏膜肌層變薄等黏膜損傷表現(xiàn)。
  6.總細(xì)菌:對(duì)照組(A組)小鼠腸道內(nèi)總細(xì)菌量豐富,抗生素單用或聯(lián)用組腸道總細(xì)菌量下降較為顯著,其中三因素聯(lián)用組(H組)腸道總細(xì)菌量最低,與對(duì)照組有極顯著性差異。腸桿菌屬:對(duì)照組小鼠腸道腸桿菌屬含量處于較低水平,抗生素單用或聯(lián)用組腸道腸桿菌屬含量明顯增加,而單因素處理的兩組(C、D組)

9、以及聯(lián)用組(F、G組)腸桿菌屬含量則變化不大。雙歧桿菌屬:抗生素單用或聯(lián)用組腸道雙歧桿菌屬數(shù)量有所下降,與對(duì)照組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。腸球菌屬:B-G組小鼠腸道腸球菌數(shù)量未見顯著性改變,僅H組小鼠腸道出現(xiàn)較大幅度的增加。總真菌:單獨(dú)接受白色念珠菌灌胃的D組小鼠第18天時(shí)腸道總真菌量與對(duì)照組無差異,提示白色念珠菌在該組小鼠胃腸道中出現(xiàn)了“一過性”現(xiàn)象,而H組小鼠總真菌數(shù)量大幅增加,與對(duì)照組有較顯著性差異。B/E值:對(duì)照組小鼠B/E值平均值達(dá)到1.

10、344,腸道定植抗力良好,而抗生素處理組別則下降明顯。
  7.與對(duì)照組相比,除接受化療處理的C組IL-17水平下降明顯外,單獨(dú)抗生素處理(B組)或白色念珠菌灌胃處理組(D組)小鼠血清五種細(xì)胞因子水平均無顯著性變化;接受化療聯(lián)用的G組和H組細(xì)胞因子水平均出現(xiàn)不同程度的下降,而未接受化療處理的F組主要表現(xiàn)為炎癥因子IL-10、IL-17、TNF-α、IFN-γ水平的大幅度增高。
  結(jié)論:
  1.抗生素使用不當(dāng)造成腸道

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