小鼠Flt3L基因克隆與表達純化及其生物學活性鑒定.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩43頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內容提供方，若內容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

1、目的：獲得小鼠Flt3L(FL)序列，構建表達小鼠FL蛋白的原核表達載體PGEX-4T3/mFL,并誘導其表達、純化及鑒定其生物學活性。
　　 方法：提取C57BL/6小鼠脾臟總RNA，逆轉錄成cDNA，采用小鼠FL序列特異性引物PCR擴增FL cDNA，構建重組質粒PGEX-4T3/mFL。經PCR、酶切和測序鑒定后，轉化大腸桿菌BL21，用IPTG進行誘導表達。GST親和層析方法純化目的蛋白并進行SDS-PAGE檢測。通過體

2、外培養(yǎng)pDC的方法檢測其生物學活性。
　　 結果：⑴經測序證實，獲得的目的基因與GenBank公布的小鼠Flt3L基因序列(NM_013520.3)的同源性為99%一致，僅第688位堿基不同。NM_013520.3序列該處堿基為T，克隆序列為C。但兩個序列中，該堿基對應的密碼子所編碼的氨基酸均為脯氨酸，屬于同義突變。⑵構建的原核表達載體PGEX-4T3/FL在大腸桿菌BL21中經IPTG誘導后表達出相對分子質量為52000的蛋白

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網頁內容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論