毛郁金醇提物抗心肌缺血活性研究及姜黃素類化合物的含量測定.pdf

1、目的:
　　研究毛郁金醇提物抗心肌缺血的藥理活性及其急性毒性和遺傳毒性。測定不同濃度乙醇提取毛郁金所得醇提物中姜黃素類化合物的含量。
　　方法:
　　1、分別以30％，50％，70％，90％乙醇提取毛郁金，得醇提物。給予提取物預處理9天后，采用尾靜脈注射垂體后葉素(Pituitrin，Pit)和皮下注射異丙腎上腺素兩種方法制作急性心肌缺血大鼠模型，記錄造模后大鼠心電圖ST段、T波及心率的變化，并測定血清中總抗氧化能力(

2、Total antioxidant capacity,T-AOC)，超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)，一氧化氮(Nitricoxide，NO)，肌酸激酶同工酶(Creatinine kinase-MB，CK-MB)，乳酸脫氫酶(Dehydrogenase，LDH)和丙二醛(Malondialdehyde，MDA)的含量。
　　2、將70只大鼠，隨機分為7組，每組10只，即:假手術(Sham)組、模

3、型對照組(Model)、復方丹參組(Danshen.Co)、姜黃素組，毛郁金70％乙醇提取物低、中、高劑量組。復方丹參組和毛郁金醇提物組給予復方丹參和毛郁金提取物，假手術組、模型對照組給予等體積生理鹽水。連續(xù)給藥7天后，通過結(jié)扎大鼠冠狀動脈左前降支30 min后，松開結(jié)扎線再灌注180min構(gòu)建心肌缺血再灌注損傷模型。再灌注180min后腹主動脈取血分離血清，測定血清GSH-Px，T-AOC，SOD，NO，CK-MB，LDH和MDA含量

4、。
　　3、采用高效液相色譜法測定30％，50％，70％，90％乙醇提取毛郁金所得醇提物中去甲氧基姜黃素(demethoxycurcumin，DMC)和姜黃素(curcumin，Cur)含量。
　　4、以最大給藥體積，最大給藥濃度，于24h內(nèi)1次性給予小鼠毛郁金70％乙醇提取物灌胃，連續(xù)觀察14天，記錄小鼠中毒和死亡情況，測定最大耐受量(Mean temperature difference，MTD);采用5 mg，2.5

5、mg，1.25 mg，0.625和0.3125 mg/皿五個劑量組進行鼠傷寒沙門菌回復突變實驗(Ames試驗)，采用25.6，12.8，6.4 g·kg-13個劑量組進行小鼠骨髓微核實驗，采用12.8，6.4，3.2 g·kg-1三個劑量組進行小鼠精子畸形實驗。
　　結(jié)果:
　　1、不同濃度乙醇提取得到的毛郁金醇提物均能有效的促使心率和心電圖ST段和T波恢復正常，減少心肌缺血時CK-MB，LDH釋放，降低MDA含量，提高血清

6、抗氧化酶SOD，T-AOC和NO含量，其中70％乙醇提取物的保護心肌缺血活性相對較好。
　　2、在心肌缺血再灌注損傷模型中，與正常對照組比較，模型對照組大鼠血清CK-MB、LDH及MDA水平顯著提高(P＜0.05），T-SOD、T-AOC及NO水平明顯下降(P＜0.05）;與模型對照組比較，高、中、低劑量濃度的毛郁金醇提物均可以顯著提高T-SOD、T-AOC及NO水平(P＜0.05），降低血清CK-MB、LDH及MDA含量(P＜0

7、.05)。
　　3、毛郁金30％，50％，70％，90％乙醇提取物中去甲氧基姜黃素含量分別為:8，12，61，72ug/ml;姜黃素含量分別為14，17，53，57 ug/ml。4
　　、在急性毒性實驗中，給藥組小鼠未出現(xiàn)死亡情況，毛郁金醇提物的最大耐受量為25.6g·kg-1，相當于毛郁金原生藥197 g·kg-1，約為成人臨床口服用藥量的300倍;在遺傳毒性實驗中，Ames試驗、骨髓微核實驗、精子畸形實驗結(jié)果均為陰性。<

8、br>　　結(jié)論:
　　1、毛郁金不同濃度乙醇提取物均對急性心肌缺血模型顯示良好的抗心肌缺血活性。綜合分析，我們認為70％乙醇提取的毛郁金抗心肌缺血的保護作用最佳。各劑量組的毛郁金醇提物對大鼠心肌缺血再灌注損傷均顯示良好的保護作用，尤其以300mg·kg-1劑量組保護作用最佳。毛郁金醇提物抗心肌缺血及預防心肌缺血再灌注損傷的機制有待進一步研究，目前我們認為其可能與增強機體抗氧化酶活性，減少氧自由基有關。
　　2、毛郁金醇提物中