一株粘質(zhì)沙雷氏菌的篩選及其所產(chǎn)紅色素抗癌功能初步研究.pdf

1、靈菌紅素(Prodigiosin)是由粘質(zhì)沙雷氏菌產(chǎn)生的一類紅色次級(jí)代謝產(chǎn)物，其分子中含有三個(gè)共軛的吡咯環(huán)。隨著對(duì)靈菌紅素研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)靈菌紅素具有抗癌、抗菌、抗瘧疾、免疫抑制和抑藻的功效。靈菌紅素的抗癌性優(yōu)勢(shì)主要體現(xiàn)在對(duì)癌細(xì)胞的較強(qiáng)天的針對(duì)性上，作為一種新型抗癌藥物的前體物質(zhì)，粘質(zhì)沙雷氏菌和靈菌紅素的研究引起了國(guó)內(nèi)外學(xué)者廣泛的關(guān)注。
　　本文主要完成鱖魚(yú)腸道中一株粘質(zhì)沙雷氏菌株的篩選和鑒定，并將其命名為S.marcesce

2、ns HFUT1301。色素的分離、純化和結(jié)構(gòu)鑒定;培養(yǎng)基組分和發(fā)酵條件的優(yōu)化，以提高色素的產(chǎn)量;通過(guò)MTT法測(cè)定靈菌紅素對(duì)肺癌細(xì)胞A-549、乳腺癌細(xì)胞MCF-7的生長(zhǎng)抑制性，考察靈菌紅素對(duì)兩種常見(jiàn)的癌細(xì)胞的抑制作用。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:
　　(1)通過(guò)單菌落觀察、菌株的生理生化鑒定和16S rDNA序列分析，與NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)和鑒定，確定試驗(yàn)所得菌株為一株新型粘質(zhì)沙雷氏菌，并將其命名為Smarcescens HFUT13

3、01。
　　(2)色素的結(jié)構(gòu)分析:通過(guò)UV-Vis全波長(zhǎng)掃描、LC-MS、FT-IR和NMR圖譜的對(duì)色素進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析和鑒定，確定該色素為靈菌紅素色素，分子式為C20H25N3O（對(duì)應(yīng)的分子量為323），并推測(cè)了紅色素的結(jié)構(gòu)式。
　　(3)為了進(jìn)一步提高S.marcescens HFUT1301發(fā)酵產(chǎn)靈菌紅素的產(chǎn)量，對(duì)培養(yǎng)基組分和發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果表明:當(dāng)一級(jí)大豆油、蛋白胨、NaCl和K2HPO4的添加量分別為4％(v/w

4、)、1.5％(w/w)、0.15％(w/w)和0.15％(w/w);發(fā)酵條件為:溫度為30℃、接種量為1％(v/v)、裝液量為70mL/250mL三角瓶、振蕩培養(yǎng)轉(zhuǎn)速為200r/min，在粘質(zhì)沙雷氏菌進(jìn)行發(fā)酵36h后，靈菌紅素的產(chǎn)量最大為2.98g/L。此時(shí)對(duì)應(yīng)粘質(zhì)沙雷氏菌的胞外脂肪酶最高活性為20U/mL。
　　(4)采用MTT法測(cè)定不同濃度的靈菌紅素，對(duì)人肺癌細(xì)胞A-549和人乳腺癌細(xì)胞MCF-7的生長(zhǎng)抑制作用。在最大血藥濃度