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文檔簡介
1、目的:研究Dicer表達水平對H3K18乙?;降恼{(diào)節(jié)作用。
方法:用免疫共沉淀檢測Dicer和SIRT7的相互作用,用免疫熒光對Dicer和S1RT7進行共定位,通過免疫印跡以及實時熒光定量檢測DNA損傷處理后Dicer、SIRT7、H3K18Ac、Lamin A/C及總H3的表達水平,亞細胞生化分離后用免疫印跡法檢測這些蛋白的亞細胞定位。
結果:SIRT7是一種NAD+依賴的組蛋白去乙?;?,能夠作用于組蛋白H
2、3K18位點,導致H3K18Ac去乙酰化。我們發(fā)現(xiàn)Dicer能夠與SIRT7相互作用,導致一部分SIRT7定位在細胞質中。Dicer的表達水平?jīng)Q定了SIRT7的亞細胞定位,Dicer表達增加導致SIRT7從染色質轉位到細胞質中,Dicer表達降低導致SIRT7從細胞質轉位到染色質上。Dicer敲除導致與染色質結合的SIRT7增加,同時降低細胞質的SIRT7。過表達Dicer導致與染色質結合的SIRT7減少,細胞質中的SIRT7增加。DN
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