利用雙光子顯微鏡在體觀察脊髓半切后小鼠感覺(jué)皮層后肢代表區(qū)樹(shù)突棘的變化.pdf

1、目的:脊髓損傷可以導(dǎo)致多層次的中樞神經(jīng)系統(tǒng)的重塑，其中就包括大腦皮層。本實(shí)驗(yàn)使用雙光子顯微鏡活體觀察的方法探究脊髓半切后小鼠大腦雙側(cè)后肢感覺(jué)和運(yùn)動(dòng)皮層樹(shù)突棘和軸突膨體的變化以探討脊髓損傷后皮層的重塑問(wèn)題。
　　方法:將40只YFP小鼠隨機(jī)分為兩大組:感覺(jué)皮層組和運(yùn)動(dòng)皮層組，每組20只，每大組再隨機(jī)分為兩小組:對(duì)照組和脊髓損傷組（SCI組），每組10只，對(duì)照組切除椎板不損傷脊髓，脊髓損傷組切除椎板同時(shí)半切左側(cè)胸段脊髓(T12)。分別

2、在脊髓損傷前1天、損傷后3天(3d)、2周(2w)和1月(1m)時(shí)對(duì)兩側(cè)后肢感覺(jué)皮層（感覺(jué)皮層組）和運(yùn)動(dòng)皮層（運(yùn)動(dòng)皮層組）區(qū)域各成像四次。通過(guò)對(duì)同一位置的同一樹(shù)突棘或軸突膨體（運(yùn)動(dòng)皮層）在不同時(shí)間點(diǎn)圖像的對(duì)比，統(tǒng)計(jì)出新形成、消失和穩(wěn)定存在的樹(shù)突棘或軸突膨體（運(yùn)動(dòng)皮層）的數(shù)量，計(jì)算變化的概率以及和時(shí)間的關(guān)系，同時(shí)計(jì)算出穩(wěn)定、消失、新形成的樹(shù)突棘在以后較長(zhǎng)時(shí)間段的存活率。
　　結(jié)果:感覺(jué)皮層重塑方面，與對(duì)照組相比，SCI組半切后3d和

3、2w時(shí)對(duì)側(cè)感覺(jué)皮層新形成的樹(shù)突棘明顯增加，雙側(cè)感覺(jué)皮層在脊髓半切后2w和1m時(shí)消失的樹(shù)突棘明顯增多，穩(wěn)定的樹(shù)突棘數(shù)量明顯減少。在損傷后3d到2w期間，SCI組雙側(cè)皮層的原本穩(wěn)定的樹(shù)突棘的存活率明顯下降。與SCI組對(duì)側(cè)皮層和對(duì)照組相比，SCI組同側(cè)皮層消失的樹(shù)突棘重新出現(xiàn)的概率下降。在損傷后2w到1m期間，SCI組雙側(cè)皮層新形成的樹(shù)突棘的存活率下降。運(yùn)動(dòng)皮層重塑方面，與對(duì)照組相比，SCI組半切后在1個(gè)月內(nèi)兩側(cè)運(yùn)動(dòng)皮層軸突膨體并無(wú)明顯變化;

4、而在樹(shù)突棘方面，與對(duì)照組相比，SCI組雙側(cè)運(yùn)動(dòng)皮層在脊髓半切后2w時(shí)消失的樹(shù)突棘明顯增多，穩(wěn)定的樹(shù)突棘數(shù)量明顯減少，半切后1m時(shí)對(duì)側(cè)運(yùn)動(dòng)皮層新形成的樹(shù)突棘明顯增加。在損傷后3d到2w期間，SCI組雙側(cè)運(yùn)動(dòng)皮層的原本穩(wěn)定的樹(shù)突棘的存活率明顯下降，消失的樹(shù)突棘重新出現(xiàn)的概率下降。在損傷后2w到1m期間，SCI組對(duì)側(cè)運(yùn)動(dòng)皮層新形成的樹(shù)突棘的存活率下降。
　　結(jié)論:脊髓半切后小鼠后肢感覺(jué)和運(yùn)動(dòng)皮層均發(fā)生重塑，重塑發(fā)生在兩側(cè)皮層。重塑不僅涉