自組裝透明質酸納米粒作為天冬酰胺酶運送載體的研究.pdf

1、蛋白質和多肽藥物是生物大分子，在臨床使用的過程中非常容易變性導致失活。因此，應用藥物載體或運輸系統(tǒng)提高其穩(wěn)定性就顯得非常有必要。藥物運載體在提高藥物的穩(wěn)定性療效方面有許多優(yōu)點，例如，可以提高蛋白質/多肽在水溶液中的穩(wěn)定性;控制蛋白質/多肽分子的釋放，以持續(xù)的緩釋避免突釋帶來的副作用。透明質酸(HA)，是一種高分子(105-107Da)天然粘多糖，廣泛存在于體液和組織中。由于生物可降解性、低的免疫原性，HA是作為藥物緩釋載體的理想材料。天

2、冬酰胺酶是治療急性淋巴細胞白血病(ALL)和其它造血系統(tǒng)惡性腫瘤的藥物。天冬酰胺酶能夠催化天冬酰胺轉化為天冬氨酸和氨。然而作為一種外源蛋白，天冬酰胺酶在臨床使用中會過早失活、被快速清除，需要反復注射來維持治療水平，導致免疫應答反應。因此，可以通過將天冬酰胺酶包埋入載體來增長酶在血液循環(huán)中的半衰期。
　　采取活性酯法制備脫氧膽酸酸化透明質酸，通過控制脫氧膽酸的加入量制得不同取代度的HD耦合物。隨著HD耦合物中氨基化脫氧膽酸的增加，取

3、代度增加，耦合物的平均分子量也相應的增加。應用超聲法制備自組裝納米粒懸液，用動態(tài)光散射儀進行了粒徑大小和粒度分布檢測，發(fā)現(xiàn)不同取代度HD耦合物超聲得到的納米粒徑數(shù)值也不同。Zeta電位是表征表面電荷的重要指標，取代度不同的HD納米耦合物Zeta數(shù)值均為負值，并且相差不大。隨后檢測稀釋濃度、儲存時間、外界環(huán)境pH、離子強度和疏水強度等不同條件對HD耦合物穩(wěn)定性有一定的影響。
　　將天冬酰胺酶包載于納米粒中，測試了HD納米粒包載藥物天

4、冬酰胺酶的載藥量和包封率，隨著天冬酰胺酶加入量的增加，HD耦合物納米溶液的載藥量增加，包封率降低。通過對天冬酰胺酶體外釋放的研究，得出取代度越大，藥物釋放越緩慢，緩釋效果越好。驗證了不同離子強度對HD納米粒載藥量的影響，說明納米粒和酶分子之間存在著疏水相互作用。對所使用材料的血液相容性做了測試，證明材料生物相容性好。
　　通過對比天冬酰胺酶和自組裝納米粒天冬酰胺酶復合物酶的酶活力性質的差別，探究了不同反應溫度和不同酸堿度對復合酶和