棉花細胞質(zhì)雄性不育相關(guān)線粒體基因篩選.pdf

1、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文棉花細胞質(zhì)雄性不育相關(guān)線粒體基因篩選姓名：鞏養(yǎng)倉申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：作物遺傳育種指導(dǎo)教師：邢朝柱20080601A b s t r a c tC y t o p l a s m i cm a l es t e r i l i t y ( C M S ) i s am a t e r n a l l yi n h e r i t e d t r a i ta n d a u b i q u i t o u s

2、p h e n o m e n o n i np l a n t s ．I th a su n i q u ea d v a n t a g e s O nu t i l i z i n gh e t e r o s i si nt h ec a s eo f t h eh y b r i dp r o d u c t i o n 。a n di t b r i n g sh u g ee c o n o m i c a n d s o

3、 c i a l b e n e f i t s ；I n t h e o r y , i t i s a l s o a g o o d m a t e r i a l O i l t h e r e a s e a r c h o f p o l l e nd e v e l o p m e n t ，c y t o p l a s m i c n u c l e a ri n t e r a c t i o n a n dg e

4、n e t i c t r a n s f o r m a t i o n o fc e l l o r g a n e l l e ．B u t t h em o l e c u l a r m e c h a n i s m o f C M S i s n o t c l e a r , s om o r e a n dm o r er e s e a r c h e ss h o w g r e a ti n t e r e s

5、t s i ni t ．M o s tr e s u l t s d e m o n s t r a t e d m a t m i t o c h o n d r i o n i S c o r r e l a t e d w i t h C M S ．A n d s o m e C M S - a s s o c i a t e dm i t o c h o n d r i a lg e n e s o ro 剮P sh a db

6、e e n d e t e c t e di n S O m ep l a n t s ．C o t t o ni s a r e p r e s e n t a t i v e o f o f t e nc r o s s - p o l l i n a t e d p l a n t s a n d a s i g n i f i c a n te c o n o m i cc r o p ．B u t m o l e c u l

7、a rr e s e a r c h e so nc o R o n l a g g e db e h i n d o t h e rc r o p s ，W i t h t h e d e v e l o p m e n to fo u rl i v e s ，t h e y i e l da n d q u a l i t y o fc o R o nn e e d t o b ei m p r o v e d ．T h i si

8、sas e r i o u sc h a l l e n g ef o rc o t t o nr e s e a r c h e r s ．B yu s i n gC M S s y s t e mt op r o d u c eh y b r i ds e e d s i s a ne f f i c i e n t a n d p o t e n t i a l w a y t o s o l v e t h i s p r o

9、b l e m ．B u tr e s e a r c h e s o n t h e m o l e c u l a rm e c h a n i s m o f C M S i nc o t t o n a r es t i l ll e s s 。I nt h i sr e s e a r c h 。Gh a r k n e s s i i B r a n d e g e e Sa n d i t sm a i n t a i n

10、 e rFw e r eu s e d a s m a t e r i a l s ；a n d t h e m e t h o do f R F L P ( R e s t r i c t i o nf r a g m e n t l e n g t h p o l y m o r p h i s m ) ，N o r t h e r nb l o ta n dG e n o m ew a l k i n gw e r ep e r

11、f o r m e dt o s c r e e n t h em i t o c h o n d r i a lg e n ea s s o c i a t e dw i t hC M S i nc o t t o n 。H e r ea t et h en l a i n r e s u l t sa n d c o n c l u t i o n so f t h er e s e a r c h ：1 ．T e nC M S ．

12、a s s o c i a t e dm i t o e h o n d r i a lg e n e s ( 口社，a t p 6 ，a t p 9 ，c o b ，C O XI ，C O X I I ，c o x l I l , , h a d 3 ，h a d 6a n dh a d 9 ) w e r e t a k e na sp r o b e s i na n a l y s i so f R F L P ．T h r e

13、 e o f t h e m , a e , a 、c o x l f fa n d 礎(chǔ)d i s p l a y e dp o l y m o r p h i s m ．2 ．N o r t h e r nb l o tW a s p e r f o r m e d t o f u r t h e rc o n f i r mt h ed i f f e r e n te x p r e s s i o np a t t e r nb

14、 e t w e e nC M S l i n ea n di t s m a i n t a i n e rf o rt h e s e t h r e ep o l y m o r p h i cg e n e s ．硼幢r e s u l td e m o n s t r a t e dt h a ta t p Aa n dc o x l f fw e r e d e t e c t e di nm a i n t a i n e

15、 rb u ta b s e n ti nC M S ；o n e b a n d o f n a d 6 c o u l db ed e t e c t e di nm a i n t a i n e rb u tt w o b a n d s i nC M S l i n e ．3 ．T o t a l l y2 4 3 6 8 b p o fs e q u e n c e o fa t p a 、c o x l Ha n dn a

16、 d 6 a n d t h e i rf l a n k i n gs e q u e n c ew e r e g o t t e nv i aP e R o ff l a n k i n gs e q u e n c e ，c l o n i n ga n ds e q u e n c i n g ( i n c l u d i n g1 2 1 5 6 b po f m a i n t a i n e ra n d1 2 2 1

17、 2b po fC M Sl i n e ) ，o fw h i c h ，7 7 7 5b pf r o ma t p Aa n d i t s f l a n k i n g s e q u e n c e ( i n c l u d i n g 3 8 6 8b p o fm a i n t a i n e ra n d3 9 0 7b po fC M S l i n e ) ，4 6 4 7b pf r o m c o x l

18、f f ( i n c l u d i n g2 3 1 5b po fm a i n t a i n e ra n d2 3 3 2 b p o fC M S l i n e ) a n dl19 4 6 b pf r o mh a d 6 ( i n c l u d i n g2 3 15b p o fm a i n t a i n e ra n d2 3 3 2 b po f C M Sl i n e ) ．4 ．T h ea l

19、 i g n m e n t so f c o r r e s p o n d i n gD N A s e q u e n c e sb e t w e e nC M S a n d i t sm a i n t a i n e rw e r e t a k e nu s i n gb i o i n f o r m a t i ct o o lC 王A S T 札X ．T h e r e s u l tr e v e a l e d

20、 t h a tm o s t b a s e so fc o x P I a n dh a d 6a r es a t r ℃e x c e p t f o rs o m e b a s e sd i f f e r e n c eb e t w e e nt w o m a t e r i a l s ，w h i l ef o r t h ea t p a g e n e ，af r a g m e n t o fa b o u

21、t5 0 0b pd o w n s t r e a mo ft h e a t p Ag e n ew e r ei s o l a t e di nC M S l i n e ，w h i c hw a ss i g n i f i c a n t l yd i f f e r e n tf r o m i t sm a i n t a i n e r ．5 。W i t ht h ea n a l y s i so f b i o