鳡魚(yú)胚胎發(fā)育與群體遺傳多樣性分析.pdf

1、鳡魚(yú)(Elopichthys bambusa)為大型上等經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi)，廣泛分布于我國(guó)各大江河湖泊之中，但近年來(lái)，由于水質(zhì)惡化、水利工程建設(shè)等因素致使鳡魚(yú)的天然資源急劇萎縮，現(xiàn)已被列入國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)瀕危及受威脅水生生物種名錄。本研究對(duì)鳡魚(yú)的胚胎發(fā)育、遺傳多樣性和種間鑒定三個(gè)方面進(jìn)行了研究探討。
　　 1. 以人工繁殖所得的受精卵為材料，觀察了長(zhǎng)江鳡魚(yú)(E. Bambusa)的胚胎發(fā)育過(guò)程，對(duì)各個(gè)發(fā)育期的形態(tài)特征進(jìn)行了描述和顯微照相。結(jié)果

2、表明：長(zhǎng)江鳡魚(yú)受精卵圓球形，平均卵徑為2.0-2.5mm，吸水膨脹后平均卵徑為7.5-8.5mm，為非粘性漂流性卵；受精卵孵化分為胚盤(pán)階段、卵裂階段、囊胚階段、原腸階段、神經(jīng)胚階段、器官分化階段和出膜等7個(gè)階段；在溫度為22-25℃、長(zhǎng)江江水中，長(zhǎng)江鳡魚(yú)胚胎發(fā)育歷時(shí)27h45min 孵出仔魚(yú)，總積溫為663℃·h。
　　 2. 利用ISSR和AFLP 分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)長(zhǎng)江下游蘇州段野生和野生F1 代人工養(yǎng)殖的兩個(gè)鳡魚(yú)(E. Bam

3、busa)群體遺傳多樣性進(jìn)行分析研究。從77個(gè)ISSR 引物中篩選出4個(gè)引物對(duì)鳡魚(yú)兩個(gè)群體48個(gè)樣品進(jìn)行擴(kuò)增，得到41個(gè)清晰的擴(kuò)增位點(diǎn)。
　　 鳡魚(yú)野生和野生F1代人工養(yǎng)殖兩個(gè)群體的多態(tài)位點(diǎn)比率和Shannon's 指數(shù)分別為21.95％、17.07％，0.0724、0.0426。基因分化系數(shù)Gst和Shannon's 指數(shù)估算分析均顯示兩個(gè)鳡魚(yú)群體之間出現(xiàn)一定遺傳分化。鳡魚(yú)UPGMA 系統(tǒng)樹(shù)有較明顯的歧化，表現(xiàn)出一定的遺傳趨異

4、。6 對(duì)AFLP 選擇性引物在兩個(gè)群體47個(gè)個(gè)體中，共擴(kuò)增出313個(gè)位點(diǎn)，多態(tài)位點(diǎn)47個(gè)。鳡魚(yú)野生和野生F1 代人工養(yǎng)殖兩個(gè)群體的多態(tài)位點(diǎn)比率為13.42％、8.31％，Shannon's 指數(shù)為0.0544、0.0320；前者遺傳多樣性較后者略高?；蚍只禂?shù)Gst和Shannon's 指數(shù)分析均顯示兩個(gè)鳡魚(yú)群體之間出現(xiàn)一定遺傳分化。鳡魚(yú)UPGMA 系統(tǒng)樹(shù)有分支且依據(jù)群體分別聚類(lèi)，表現(xiàn)出一定的遺傳趨異。結(jié)果分析表明，鳡魚(yú)群體的遺傳多樣

5、性相對(duì)貧乏；野生F1 代人工養(yǎng)殖群體尚未形成自己獨(dú)立的遺傳結(jié)構(gòu)，但兩個(gè)群體間已經(jīng)產(chǎn)生了一定的遺傳分化，經(jīng)過(guò)較多世代的人工繁育有可能形成自己獨(dú)立而穩(wěn)定的遺傳結(jié)構(gòu)。
　　 3. 用3個(gè)ISSR 引物對(duì)鳡魚(yú)(E. Bambusa)、草魚(yú)(Ctenopharyngodon idellus)和赤眼鱒(Squaliobarbus curriculus)進(jìn)行簡(jiǎn)單重復(fù)序列區(qū)間擴(kuò)增（ISSR)遺傳分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：(1)三種魚(yú)類(lèi)的種間遺傳相似度以鳡

6、魚(yú)和草魚(yú)之間為最高(0.7157)，鳡魚(yú)和赤眼鱒之間為最低(0.3041)；遺傳分化系數(shù)Gst 均大于0.9 并且鳡魚(yú)和草魚(yú)的遺傳分化系數(shù)最大(0.9806)；UPGMA 系統(tǒng)樹(shù)顯示三種魚(yú)類(lèi)分為兩支，鳡魚(yú)和草魚(yú)首先聚在一起，最后與赤眼鱒聚類(lèi)。(2）3個(gè)引物均具有種的特異性擴(kuò)增帶。其中引物ISSR8 擴(kuò)增的1550和760bp 帶，引物ISSR62 擴(kuò)增的700bp 帶，引物ISSR76擴(kuò)增的790bp 帶為赤眼鱒的特異性譜帶；引物ISS

7、R8 擴(kuò)增的2000和1875bp 帶，引物ISSR62 擴(kuò)增的1380bp 帶，引物ISSR76 擴(kuò)增的1240和520bp 帶為鳡魚(yú)和草魚(yú)的共有特異性譜帶；引物ISSR8 擴(kuò)增的1190bp 帶為鳡魚(yú)和赤眼鱒的共有特異性譜帶；引物ISSR8 擴(kuò)增的1340和1000bp，引物ISSR76 擴(kuò)增的2000bp 帶為草魚(yú)和赤眼鱒的共有特異性譜帶。結(jié)果表明：鳡魚(yú)、草魚(yú)和赤眼鱒的遺傳差異顯著，分類(lèi)地位至少在種的水平上，這與三種魚(yú)的形態(tài)分類(lèi)在