脫氫醋酸鈉致大鼠和家兔出血的初步研究.pdf

1、目的:脫氫醋酸鈉(Sodium Dehydroacetate)抗菌譜廣，具有較好的防霉效果，作為防腐劑廣泛用于食品、飼料及化妝品等相關(guān)領(lǐng)域。高劑量應(yīng)用脫氫醋酸鈉可能引起大鼠有出血傾向。本課題組前期研究中也發(fā)現(xiàn)脫氫醋酸鈉能引起大鼠多器官出血。本文通過給予大鼠和家兔不同劑量脫氫醋酸鈉，檢測凝血指標(biāo)PT和APTT，測定血液中VK1、脫氫醋酸鈉血藥濃度及VKORC1蛋白的表達(dá)，并對主要臟器進(jìn)行HE染色組織病理學(xué)分析，研究脫氫醋酸鈉應(yīng)用于大鼠及家

2、兔后引起的出血傾向。
　　方法:Wistar大鼠，雌雄各半，分別灌胃給予脫氫醋酸鈉50 mg/kg、100 mg/kg、150mg/kg和200 mg/kg，生理鹽水作為對照組，每組14只。每天一次，連續(xù)13d。家兔灌胃給予脫氫醋酸鈉分為100mg/kg組、200 mg/kg組和生理鹽水對照組，每組14只。在給藥后第3d、5d、7d、9d、11d和13d分別采集血液和主要臟器，每組大鼠或家兔4只。測定PT和APTT，對肝臟、脾臟、

3、肺臟、心臟和腎臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查，HPLC法檢測血液中的脫氫醋酸鈉濃度，ELISA法檢測大鼠血清VK1含量，免疫組化檢測組織中VKORC1蛋白表達(dá)。HPLC法檢測血清中脫氫醋酸鈉的濃度，色譜條件為X BridgeC18色譜柱，甲醇-0.02mol/L乙酸銨(35/65，v/v)為流動(dòng)相，293nm檢測。血液樣品經(jīng)乙腈提取、濃縮后上機(jī)測定。
　　結(jié)果:不同劑量脫氫醋酸鈉給予大鼠后，與對照組比較PT和APTT值極顯著延長(P＜0.0

4、01)，且雄鼠的PT和APTT值顯著高于雌鼠(P＜0.05)。對大鼠HE染色組織切片分析，200 mg/kg組心臟、肝臟、脾臟、肺臟和腎臟都有明顯的出血;肝臟組織的出血程度與脫氫醋酸鈉劑量有關(guān)。100-200 mg/kg劑量脫氫醋酸鈉均可引起血清中VK1的含量顯著低于生理鹽水對照組(P＜0.01)。VKORC1蛋白在大鼠肝臟、肺臟、脾臟、心臟和腎臟的表達(dá)水平均顯著低于對照組(P＜0.01)。HPLC法測定大鼠血清中脫氫醋酸鈉的濃度在20

5、-50 mg/L。相關(guān)性分析表明大鼠血清中VK1水平與PT和APTT的相關(guān)系數(shù)分別為0.719和0.599;大鼠血清中脫氫醋酸鈉濃度與PT和APTT的相關(guān)系數(shù)分別為0.900-0.988和0.806-0.852。
　　與對照組比較，100-200 mg/kg劑量脫氫醋酸鈉給予家兔7d后，PT和APTT值極顯著地延長(P＜0.001);組織病理學(xué)分析200 mg/kg組除心臟外，肝臟，脾臟，肺臟和腎臟都有明顯的出血。HPLC法測定脫

6、氫醋酸鈉在家兔的血藥濃度為5-20 mg/L。相關(guān)性分析表明家兔血清中脫氫醋酸鈉血藥濃度與PT和APTT的相關(guān)系數(shù)分別為0.837和0.351。
　　結(jié)論:較高劑量（150-200mg/kg）脫氫醋酸鈉可引起大鼠和兔凝血指標(biāo)明顯延長，主要臟器有明顯的出血;引起大鼠血液中VK1水平明顯降低，組織中VKORC1表達(dá)降低。脫氫醋酸鈉致大鼠或家兔PT和APTT延長，與脫氫醋酸鈉血藥濃度以及血清中VK1水平高度相關(guān)。脫氫醋酸鈉導(dǎo)致大鼠和家兔