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文檔簡介
1、目的:
采用機械壓迫法制備豚鼠壓瘡模型,研究封閉式負壓引流(vacuum sealing drainage,VSD)技術(shù)治療3期壓瘡的效果及機制。
方法:
?。?)造模:采用600-670g健康雄性白色豚鼠,用10%水合氯醛(300mg/kg)腹腔麻醉后對豚鼠右側(cè)后肢大轉(zhuǎn)子皮膚反復壓迫導致缺血-再灌注損傷(ischemia-reperfusion injury,IRI)以制備豚鼠IRI3期壓瘡模型。
2、?。?)分組及干預:實驗分為空白組(n=20)、常規(guī)處理組(n=20)和VSD處理組(n=20)。空白組不做任何處理;常規(guī)處理組常規(guī)換藥后用無菌多孔聚氨酯海綿敷料和紗布覆蓋,每日更換無菌敷貼;VSD處理組常規(guī)換藥后借助多孔聚氨酯海綿敷料實施VSD,外科手術(shù)貼膜封閉,接通125mmHg負壓每天持續(xù)負壓治療8h,每日更換無菌敷貼。
?。?)效果評價:分別于干預1d、3d、7d、11d后隨機選取每組實驗動物5只觀察創(chuàng)面愈合情況;創(chuàng)面面
3、積的收縮率;創(chuàng)面組織病理學變化;創(chuàng)面組織細菌含量;運用一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)和超氧化物歧化酶superoxide dismutase,SOD)測試盒監(jiān)測豚鼠血清中NOS含量和SOD含量;免疫組織化學法(immunohistochemistry,IHC)檢測不同時間點各組創(chuàng)面組織CD34和血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表達,并用
4、Image Pro Plus圖形處理軟件計算微血管密度(microvessel density,MVD)和平均光密度值(mean optical density,MOD)。
結(jié)果:
?。?)肉眼觀察創(chuàng)面:干預1d后,空白組、常規(guī)處理組創(chuàng)面血性滲出液較多,創(chuàng)周皮膚組織水腫明顯,VSD處理組創(chuàng)面血性滲出液較干預前減少。干預3d后,空白組創(chuàng)面暗紅無光澤,血性滲出液比常規(guī)處理組和VSD處理組多,創(chuàng)周皮膚組織水腫無明顯變化;常規(guī)
5、處理組創(chuàng)面呈紅色,血性滲出液、創(chuàng)周皮膚組織水腫較空白組減輕,創(chuàng)面開始緩慢收縮;VSD處理組創(chuàng)面呈紅色,有少量淡紅色滲出液,創(chuàng)周皮膚組織水腫情況較其余兩組減輕,有散在的肉芽組織生長,創(chuàng)面快速收縮。干預7d后,空白組創(chuàng)面變黑、變硬,有少量血性滲出液,創(chuàng)周皮膚組織水腫情況較干預前減輕,創(chuàng)面開始緩慢收縮;常規(guī)處理組創(chuàng)面呈紅色,滲出液少,創(chuàng)周皮膚組織仍有水腫,有少量肉芽組織生長;VSD處理組創(chuàng)面紅潤,無滲出液,創(chuàng)周皮膚組織水腫不明顯,大量肉芽組織
6、生長,創(chuàng)面面積收縮明顯。干預11d后,空白組創(chuàng)面變黑結(jié)痂,針刺有少量血液滲出,創(chuàng)周皮膚組織水腫較前減輕,創(chuàng)面面積收縮較其它兩組緩慢;常規(guī)處理組創(chuàng)面紅潤,大量肉芽組織生長,創(chuàng)面有少量結(jié)痂;VSD處理組創(chuàng)面結(jié)痂,無滲出,創(chuàng)面基本愈合。
?。?)創(chuàng)面面積收縮率:干預1d后,三組創(chuàng)面收縮率比較無明顯差異(P>0.05);干預3d后,常規(guī)處理組創(chuàng)面面積收縮率高于空白組(P<0.01), VSD處理組創(chuàng)面面積收縮率高于常規(guī)處理組和空白組(P
7、<0.01);干預7d、11d后,常規(guī)處理組創(chuàng)面面積收縮率高于空白組(P<0.01),VSD處理組創(chuàng)面面積收縮率明顯高于常規(guī)處理組和空白組(P<0.01)。
?。?)創(chuàng)面組織病理學:干預1d后,各組有大量炎性細胞浸潤,皮下組織水腫明顯,VSD處理組炎性細胞浸潤、皮下組織水腫較其余兩組輕,有少量肉芽組織生長;干預3d后,各組炎性細胞浸潤及皮下組織水腫有不同程度的減輕,VSD處理組與其余兩組相比炎性細胞浸潤及皮下組織水腫明顯減輕,肉
8、芽組織增生明顯;干預7d后,可見VSD處理組炎性細胞浸潤、皮下組織水腫程度明顯低于其余兩組,大量肉芽組織增生,膠原纖維沉積,逐漸修復、填補創(chuàng)面;干預11d后,空白組大量肉芽組織增生,仍有炎性細胞浸潤,常規(guī)處理組有大量肉芽組織增生并玻璃樣變性,VSD處理組皮膚組織缺損明顯修復,皮下見大量膠原纖維增生,瘢痕形成,皮膚附屬器結(jié)構(gòu)增多。
?。?)創(chuàng)面組織細菌含量:干預1d、3d、7d、11d后常規(guī)處理組創(chuàng)面組織的細菌含量低于空白組(P<
9、0.01),VSD處理組創(chuàng)面組織細菌含量均明顯低于常規(guī)處理組和空白組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
(5)血清中NOS、SOD含量:①干預1d、3d、7d、11d后,常規(guī)處理組的NOS含量低于空白組(P<0.01),VSD處理組的NOS含量明顯低于常規(guī)處理組和空白組(P<0.01);②干預1d、3d、7d、11d后,常規(guī)處理組的SOD含量高于空白組(P<0.01),VSD處理組的SOD含量明顯高于常規(guī)處理組和空白組(P
10、<0.01)。
?。?)創(chuàng)面組織CD34、表達及MVD、VEGF的表達及MOD:①干預1d、3d、7d、11d后,各組CD34的陽性表達呈逐漸增多趨勢,且VSD處理組>常規(guī)處理組>空白組;常規(guī)處理組MVD高于空白組(P<0.01),VSD處理組MVD高于常規(guī)處理組和空白組(P<0.01)。②創(chuàng)干預1d、3d、7d、11d后,各組VEGF的陽性表達程度逐漸增強,且VSD處理組>常規(guī)處理組>空白組;常規(guī)處理組VEGF表達的MOD高于
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