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文檔簡介
1、目的:研究不同碘攝入量對20同齡、40日齡子二代Balb/c小鼠生長發(fā)育的影響及大腦、小腦皮質和海馬的形態(tài)學改變,進一步探討碘缺乏和碘過量對子二代小鼠生長發(fā)育、大腦、小腦發(fā)育及功能的影響。 方法:選用斷乳后一個月,體重在16~20g的SPF-VAF級的Balb/c小鼠,雌雄各半,隨機分為5組:低碘組(LI)、適碘組(NI)、5倍碘組(5HI)、10倍碘組(10HI)、50倍碘組(50HI),LI組動物飼以低碘飼料(平均碘含量<5
2、0μg/kg),其余各組飼以正常飼料(平均碘含量300μg/kg),上述兩種飼料中各種糧食的配比相同,只是碘含量不同。LI組飲用去離子水,其余各組飲用含不同濃度碘化鉀的去離子水,其飲水中碘化鉀含量分別為10μg/L(NI),1200μg/L(5HI),2700μg/L(10HI),14700μg/L(50HI)。小鼠每日的碘攝入量估計如下:小鼠每日進食5g,進水5ml,各組動物每日碘攝入量分別為:<1μg/d(LI),1.5μg/d(N
3、I),7.5μg/d(5HI),15μg/d(10HI),75μg/d(50HI)。喂養(yǎng)三個月后,雌雄隨機1:1合籠,連續(xù)傳兩代,分別取20日齡、40日齡子二代小鼠腦組織,電子天平稱重,中性福爾馬林溶液固定后常規(guī)石蠟包埋,進行焦油紫染色、免疫組化(NSE、GFAP、MBP)染色,觀察大腦皮質,海馬區(qū)神經(jīng)元、星形膠質細胞及少突膠質細胞形態(tài)學的改變。應用MoticImagesAdvanced3.1圖像分析系統(tǒng)測量以下指標:焦油紫染色切片中大
4、腦皮質分子層厚度;免疫組化切片中海馬CA3區(qū)NSE陽性神經(jīng)元面數(shù)密度、平均光密度;CA1區(qū)GFAP陽性星形膠質細胞面數(shù)密度、平均光密度及MBP陽性少突膠質細胞平均光密度。小腦NSE陽性神經(jīng)元和GFAP陽性星形膠質細胞的面數(shù)密度(NA)、體積密度(VV)、細胞質的平均光密度,MBP陽性神經(jīng)纖維平均光密度,小腦皮質分子層及顆粒層厚度。 結果:1.子二代小鼠生長發(fā)育:20同齡時,LI組和50HI組子二代小鼠的體重、腦重和身長、尾長、后
5、肢長與NI組相比呈現(xiàn)出了不同程度的發(fā)育落后,其中LI組表現(xiàn)更為明顯。40日齡時小鼠體格有所增長,但與NI組比較,LI組和50HI組仍呈現(xiàn)不同程度的發(fā)育落后。2.子二代小鼠大腦皮質、海馬發(fā)育:與NI組相比,20同齡、40日齡子二代小鼠其余各組均表現(xiàn)出不同程度的腦發(fā)育差別,其中LI組、50HI組落后更為明顯,且差異有統(tǒng)計學意義。3.子二代小鼠小腦皮質、顆粒層,髓質發(fā)育:與NI組相比,20日齡、40日齡子二代小鼠其余各組小腦GFAP、NSE、
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