小鼠妊娠瘧疾對(duì)子代鼠生長發(fā)育和細(xì)胞免疫應(yīng)答的影響.pdf

1、目的：建立妊娠瘧疾的小鼠動(dòng)物模型，初步觀察妊娠期孕鼠感染瘧原蟲對(duì)子代鼠生長發(fā)育以及細(xì)胞免疫功能的影響；并初步研究胚胎期暴露瘧原蟲抗原對(duì)子代鼠易感性的影響；從而加深對(duì)妊娠瘧疾致病機(jī)制的認(rèn)識(shí)和理解。
　　方法：（1）選用清潔級(jí)成年昆明鼠合籠交配確定受孕，孕鼠在妊娠第7天、第14天、第16天分別腹腔接種伯氏瘧原蟲的6個(gè)不同劑量，觀察孕鼠流產(chǎn)例數(shù)。（2）孕鼠妊娠第14天，腹腔接種伯氏瘧原蟲1×106個(gè)/只作為實(shí)驗(yàn)組，接種相同體積生理鹽水作

2、為對(duì)照組，飼養(yǎng)孕鼠到自然分娩。觀察兩組子代新生鼠的出生體重、產(chǎn)仔數(shù)等生理指標(biāo)，并取其尾血制作血涂片。分別于子代新生鼠出生后第0、1、3、5天，解剖分離胸腺、脾臟，制備單細(xì)胞懸液，流式細(xì)胞儀檢測(cè)觀察其胸腺、脾臟中CD4/CD8 T細(xì)胞亞群的變化；（3）待兩組子代新生鼠生長至4周，再次觀察胎鼠期P.b暴露4周齡子代鼠的體重等生理指標(biāo)以及其胸腺、脾臟中CD4/CD8 T細(xì)胞亞群的變化；（4）給予兩組4周齡子代鼠腹腔接種伯氏瘧原蟲1×106個(gè)/

3、只，觀察兩組子代鼠紅細(xì)胞感染率、存活時(shí)間以及子代鼠脾臟細(xì)胞對(duì)P.b抗原刺激的增殖反應(yīng)。
　　結(jié)果：（1）孕鼠流產(chǎn)的情況隨接種時(shí)間和劑量的不同出現(xiàn)明顯變化。其中在妊娠第14天感染組孕鼠流產(chǎn)例數(shù)顯著低于第7天組(P<0.05)，而顯著高于第16天組(P<0.05)。妊娠第14天接種不同劑量的各組中，接種劑量為1×106個(gè)組的孕鼠流產(chǎn)例數(shù)明顯低于8×106個(gè)組(P<0.05)，而與其它劑量組相比無顯著差異(P>0.05)。（2）實(shí)驗(yàn)組子

4、代新生鼠的血涂片結(jié)果陰性，但其出生體重和存活個(gè)數(shù)顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。在子代新生鼠出生后第0、1、3、5天，實(shí)驗(yàn)組子代新生鼠胸腺、脾臟中 CD3+CD4+CD8-T細(xì)胞的比例均顯著高于對(duì)照組（P<0.05)，而 CD3+CD4-CD8+T細(xì)胞的比例在胸腺中均顯著低于對(duì)照組（P<0.05)，在脾臟中與對(duì)照組相比無顯著差異(P>0.05)。（3）胎鼠期P.b暴露4周齡子代鼠體重顯著低于P.b未暴露組（P<0.05)。其胸腺、脾臟中

5、CD3+CD4+CD8-T細(xì)胞的比例顯著高于P.b未暴露組（P<0.05)而 CD3+CD4-CD8+T細(xì)胞的比例顯著低于 P.b未暴露組（P<0.05)。（4）兩組4周齡子代鼠腹腔接種伯氏瘧原蟲后，P.b暴露組子代鼠存活時(shí)間顯著短于P.b未暴露組（P<0.05)。連續(xù)觀察7天，紅細(xì)胞感染率P.b暴露組顯著高于P.b未暴露組（P<0.01)。觀察接種后第3天 P.b暴露組子代鼠胸腺、脾臟中的CD3+CD4+CD8-T細(xì)胞的比例顯著高于P