受體酪氨酸激酶TIE與VEGFR-3在血管和淋巴管生成與重塑中的作用機制.pdf

1、哺乳類動物脈管系統(tǒng)的發(fā)育源于胚胎中胚層細胞，先分化形成血島及原始血管網(wǎng)絡(luò)，并經(jīng)過進一步的血管新生與成熟重塑,發(fā)育為成熟的血管網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)；淋巴管的發(fā)育源于血管靜脈。血管與淋巴管發(fā)育是一個受多基因協(xié)同調(diào)控的復雜過程，受體酪氨酸激酶Tie2與Tie1在血管與淋巴管內(nèi)皮細胞、以及部分血液細胞中有表達，利用遺傳改造的小鼠模型進行的研究表明，敲除Tie2基因?qū)е卵馨l(fā)育異常，小鼠胚胎早期致死（E10.5前）；而Tie1基因敲除小鼠在出生前死亡，主要表

2、型包括集合淋巴管形成與瓣膜發(fā)育異常并伴有出血等；但目前對于TIE信號途徑在血管與淋巴管發(fā)育中的作用機制還了解很少。另一個受體酪氨酸激酶VEGFR-3是第一個被發(fā)現(xiàn)的淋巴管內(nèi)皮細胞標志物,其介導的信號途徑在淋巴管生長中起關(guān)鍵作用，目前關(guān)于Tie1與VEGFR-3在淋巴管生長與成熟重塑過程中是否存在協(xié)同作用尚不清楚。
　　本研究利用靶向Tie2與Tie1的條件性基因敲除小鼠，結(jié)合表達CreERT2的轉(zhuǎn)基因小鼠,分析小鼠出生后誘導敲除T

3、ie2與Tie1基因?qū)ρ芘c淋巴管生成的影響。研究發(fā)現(xiàn)，Tie2在發(fā)育后期的血管中有高水平表達，但在淋巴管中的表達水平較低。通過他莫昔芬可有效誘導Tie2基因的敲除，基因敲除效率通過定量RT-PCR、免疫組化染色以及Western印跡等方法得以證實。敲除Tie2基因?qū)е乱暰W(wǎng)膜血管發(fā)育異常，但對同一時期皮膚的血管發(fā)育影響不明顯，表明Tie2在血管新生中有重要作用。同時，本項目還比較分析了Tie2與Tie1在淋巴管生成中的作用。研究結(jié)果表明

4、，小鼠出生后誘導Tie1基因敲除導致淋巴管網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)生成異常、以及淋巴管瓣膜的數(shù)量顯著減少，但同一時期敲除Tie2對淋巴管網(wǎng)絡(luò)與瓣膜的發(fā)育沒有影響。另外，利用VEGFR-3酪氨酸激酶失活性點突變雜合子小鼠模型進行的研究表明，VEGFR-3介導的信號不足導致皮膚淋巴管分支數(shù)顯著下降，且淋巴管直徑明顯加粗，但內(nèi)臟器官淋巴管表型較弱，且多數(shù)小鼠腹腔中不再出現(xiàn)乳糜滲漏。
　　因此，該項研究發(fā)現(xiàn)Tie2介導的信號途徑在視網(wǎng)膜血管新生中有關(guān)鍵作