PD-1-PD-L1在胃癌中的表達及其臨床意義的相關研究.pdf

1、目的：胃癌（Gastric Cancer GC）是我國常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一，按照2012年全球腫瘤流行病統(tǒng)計數(shù)據(jù)（GLOBOCAN2012）可知，胃癌是全球第五大常見腫瘤，亦是第三位導致癌癥相關死亡的腫瘤。在中國，胃癌居常見惡性腫瘤順位的第三位，居癌癥相關死亡順位的第二位。我國每年胃癌新發(fā)的病例數(shù)約為40萬，約占全世界總發(fā)病例數(shù)的42％。多數(shù)胃癌患者在診斷時已為晚期，生存時間較短且整體生活質量差。傳統(tǒng)的治療方法有手術、放療和化療，

2、但對于晚期胃癌，手術治愈率低，且放化療療效欠佳。近年來，免疫治療的進步及取得一定的臨床療效使其成為一種新的治療模式，免疫治療包括T淋巴細胞過繼治療、腫瘤疫苗、Toll樣受體激動劑和免疫檢查點抑制劑等。其中，免疫檢查點抑制劑發(fā)揮了重要的作用，目前對其研究方興未艾，如程序性死亡因子1（programmed cell death-1 PD-1)及其配體（programmed cell death ligand1 PD-L1），它是機體免疫系統(tǒng)

3、中的抑制性通路，該檢查點通路對于調節(jié)生理性免疫應答的持續(xù)時間和幅度、維持免疫耐受起著重要的作用，從而避免了免疫應答對正常組織的損傷和破壞。另外，該抑制性檢查點是由受體/配體的相互作用所調控，可能參與介導了腫瘤免疫逃逸的過程。前期關于PD-1和PD-L1的研究主要集中在肺癌及黑色素瘤等實體腫瘤上，并已取得了一定的臨床療效，PD-1抑制劑Nivolumab和Pembrolizumab已獲美國FDA批準分別用于晚期鱗狀非小細胞肺癌和不可切除/

4、轉移性黑色素瘤的臨床治療，但在胃癌患者的治療中尚缺乏有力證據(jù)。本研究主要通過免疫組織化學法檢測PD-1和PD-L1分子在胃癌中的表達狀況，并探討其與臨床病理特征及患者預后的關系。
　　方法：收集河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院2007年1月至2007年12月期間接受過手術的胃癌患者的腫瘤石蠟組織標本及其對應的臨床病例資料，選取術后病理分期（pTNM分期）為III期和IV期的胃癌患者共82例。收集患者的各臨床資料包括年齡、性別、腫瘤直徑大小、分

5、化程度、腫瘤部位（胃的切除范圍）、腫瘤浸潤深度、有無脈管瘤栓、有無淋巴結轉移及術前有無遠處轉移等指標。電話隨訪患者的生存狀況，采用免疫組織化學法檢測腫瘤組織中蛋白表達狀況，根據(jù)染色強度分級和陽性細胞密度分級的乘積評定PD-1和PD-L1蛋白的表達情況，對所有數(shù)據(jù)采用SPSS21.0統(tǒng)計軟件進行分析，對PD-1與PD-L1間表達相關性比較及與其臨床病理特征的關系分析采用χ2檢驗，應用Kaplan-Meier法進行生存曲線分析， Log-R

6、rank檢驗生存率差異有無統(tǒng)計學意義，對胃癌患者各項臨床指標與預后的關系進行單因素和多因素COX回歸分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結果：
　　1.胃癌患者中，PD-L1蛋白表達陽性率為42.68%，主要定位在腫瘤細胞和瘤間質浸潤淋巴細胞的細胞質和細胞膜上，腫瘤浸潤淋巴細胞顯微鏡下可呈現(xiàn)小圓形，核大漿少，點樣分布，其中腫瘤細胞上的陽性表達率為32.93%，癌間質浸潤淋巴細胞上陽性表達率為21.95%。PD-1蛋白

7、表達的陽性率為13.41%，且主要定位在腫瘤浸潤淋巴細胞（TIL）的細胞質和細胞膜上。腫瘤組織中PD-1蛋白表達陽性率低于PD-L1表達陽性率，其中43例胃癌組織呈現(xiàn)出既無PD-L1也無PD-1蛋白陽性表達。
　　2.胃癌組織中PD-1分子表達陰性患者中瘤細胞PD-L1表達陰性率、陽性率分別為70.42%、29.58%，胃癌組織中PD-1分子表達陽性患者中癌細胞PD-L1表達陰性率、陽性率分別為45.45%、54.55%（P>0.

8、05）；胃癌組織中PD-1表達陰性患者中癌間質PD-L1表達陰性率、陽性率分別為77.46%、22.54%，胃癌組織中PD-1表達陽性患者中癌間質PD-L1表達陰性、陽性率分別為81.82%、18.18%（P>0.05）。胃癌組織中PD-1蛋白表達與癌細胞和癌間質浸潤淋巴細胞中PD-L1蛋白表達均無顯著相關性。
　　3.胃癌組織中PD-1表達陽性率在術前無遠處轉移及術前有遠處轉移的患者中分別為3.28%、42.86%（P<0.05

9、），癌細胞中PD-L1表達陽性率在術前無遠處轉移及術前有遠處轉移的患者中分別為13.11%、90.48%（P<0.05），癌間質中PD-L1表達陽性率在術前無遠處轉移及術前有遠處轉移的患者中分別為13.11%、47.62%（P<0.05），胃癌組織中PD-1蛋白表達和PD-L1蛋白的表達與患者術前有無遠處轉移和腫瘤的浸潤深度密切相關，其中癌間質細胞中PD-L1蛋白的表達與腫瘤的分化程度密切相關。
　　然而胃癌組織中PD-L1表達和

10、PD-1表達與病人年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤部位及有無脈管瘤栓均無顯著相關性。
　　4.對可能影響胃癌患者預后的因素（年齡、性別、腫瘤直徑大小、分化程度、手術胃切除部位、有無脈管瘤栓、腫瘤浸潤深度、PD-L1蛋白過表達及術前有無遠處轉移等）進行單因素COX回歸分析，結果顯示，胃的切除范圍（P<0.05）、PD-L1蛋白過表達（P<0.05）及術前有無遠處轉移（P<0.05）是影響胃癌患者預后的不良因素。同時多因素COX回歸分析，結

11、果顯示，癌細胞中PD-L1蛋白表達及術前有無遠處轉移是影響患者生存期的獨立因素。根據(jù)Kaplan-Meier生存曲線分析，癌細胞中PD-L1蛋白表達與患者術后生存期呈顯著相關，PD-L1陽性表達者較陰性者術后生存時間短，Log-Rank檢驗生存率差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；而癌間質中PD-L1蛋白陽性表達與術后生存期無顯著關系。胃癌組織中PD-1表達與患者術后生存時間無顯著相關性。
　　結論：
　　1.PD-1和PD-

12、L1分子能夠表達在胃癌組織中，其中PD-L1的表達主要定位在癌細胞和癌間質浸潤淋巴細胞的細胞質和細胞膜上，PD-1的表達主要定位在TIL的細胞質和細胞膜上。
　　2.胃癌組織中PD-1表達和PD-L1蛋白表達與患者術前有無遠處轉移和腫瘤的浸潤深度密切相關。而與病人年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤部位及有無脈管瘤栓均無顯著相關。
　　3.胃癌患者中，PD-L1陽性表達者較陰性表達者的術后生存時間短，提示PD-L1表達是患者預后的獨立