聯(lián)合應(yīng)用紅霉素、青霉素及布地奈德預(yù)防兔氣管狹窄的初步研究.pdf

1、目的:建立兔氣管損傷后氣管狹窄的模型,并通過比較各組氣管狹窄率、病理改變,檢測TGF-β1 mRNA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ的表達(dá),初步探討聯(lián)合應(yīng)用紅霉素、青霉素及布地奈德預(yù)防兔氣管損傷后氣管狹窄的效果及可能的機(jī)制。
　　方法:36只家兔（雌雄不限）,體重2.5kg-3.0kg。隨機(jī)分為陰性對照組、模型對照組、青霉素組、布地奈德組、紅霉素組、紅霉素聯(lián)合青霉素+布地奈德組（聯(lián)合用藥組）,每組6只,每組均在全身麻醉下行氣管切開,陰性對

2、照組氣管切開后直接縫合氣管（不給予氣管刷擦）,其余各組均行氣管切開后,予硬質(zhì)尼龍均勻用力來回刷擦20次氣管內(nèi)膜各壁刷刮除氣管黏膜后間斷縫合氣管。紅霉素采用灌胃法給藥,13.6mg/kg,每日2次;青霉素采用肌注給藥,4.35萬單位/kg,每日2次;布地奈德采用霧化吸入給藥,0.05mg/kg,每日2次。均于術(shù)前7天開始給藥至術(shù)后10天。術(shù)后10天處死兔子,收集氣管組織,HE染色后光學(xué)顯微鏡下,觀察測量氣管狹窄率及氣管組織病理學(xué)改變; q

3、RT-PCR法檢測各組氣管組織TGF-β1mRNA的相對表達(dá)量;免疫組織化學(xué)法檢測各組氣管組織中Col-Ⅰ、Col-Ⅲ的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:(1)管腔狹窄率比較:聯(lián)合用藥組管腔狹窄率為(28.17±3.38)％,顯著低于模型對照組(53.95±7.09)％、青霉素組(44.78±4.03)％、布地奈德組(49.90±5.47)％、紅霉素組（35.11±4.50）％,（t值分別為9.29、5.98、7.83和2.50,均P＜0.0

4、5）。(2)組織病理學(xué)比較:陰性對照組的黏膜、黏膜下層和外層清晰可見,黏膜下層纖維結(jié)締組織疏松,見少量淋巴細(xì)胞、成纖維細(xì)胞,未見小血管增生;模型對照組可見大量炎癥細(xì)胞浸潤、成纖維細(xì)胞增殖及大量新生小血管;聯(lián)合用藥組見少量炎癥細(xì)胞浸潤,未見明顯成纖維細(xì)胞、小血管增生。(3)氣管組織中TGF-β1mRNA的相對表達(dá)量:聯(lián)合用藥組TGF-β1mRNA相對表達(dá)量顯著低于模型對照組、青霉素組、布地奈德組、紅霉素組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.0

5、5）;布地奈德組TGF-β1 mRNA的相對表達(dá)量與模型對照組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。(4)氣管組織中Col-Ⅰ、Col-Ⅲ的表達(dá):Col-Ⅰ、Col-Ⅲ主要表達(dá)于黏膜下層細(xì)胞外基質(zhì)中;聯(lián)合用藥組Col-Ⅰ、Col-Ⅲ平均光密度值顯著低于模型對照組、青霉素組、布地奈德組、紅霉素組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）;布地奈德組Col-Ⅰ、Col-Ⅲ平均光密度值與模型對照組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。