絲裂霉素C預防家兔喉氣管狹窄的實驗研究.pdf

1、喉氣管狹窄的常見原因為喉氣管外傷、高位氣管切開、氣管插管等造成瘢痕過度增生，瘢痕攣縮。目前治療的主要方法是內(nèi)鏡激光手術(shù)切除瘢痕后再置入支架維持一定的氣管通道，但存在一定的復發(fā)率，治療效果不理想。而藥物治療操作簡單、能避免二次創(chuàng)傷，患者更容易接受，其中絲裂霉素C由于價格便宜，副作用小，一直是治療喉氣管狹窄研究最多的藥物。
　　關(guān)于瘢痕狹窄的基礎研究，研究學者普遍認為瘢痕的形成與一系列細胞生長因子水平的改變有密切關(guān)系，其中與轉(zhuǎn)化生長因

2、子β1（TGF-β1）、堿性成纖維細胞生長因子（bFGF）關(guān)系最為密切。但在瘢痕形成的過程中，生長因子之間有復雜的交叉，絲裂霉素C作用的機制仍待進一步研究。
　　本課題通過構(gòu)建一種簡單、穩(wěn)定的兔喉氣管狹窄模型，將絲裂霉素C作為單一變異因素，主要研究絲裂霉素C治療喉氣管狹窄的有效性和可行性。并初步探討絲裂霉素C抑制成纖維細胞增生的相關(guān)作用機制。
　　第一部分兔喉氣管狹窄模型的構(gòu)建和絲裂霉素C用藥效果監(jiān)測
　　目的檢測兔喉

3、氣管狹窄模型的穩(wěn)定性，探討絲裂霉素C在治療兔喉氣管狹窄中的作用。
　　方法將30只家兔按照簡單隨機化分組分為對照組、模型組、0.5mg/ml低濃度用藥組、2mg/ml中濃度用藥組、5mg/ml高濃度用藥組。用喉氣管刮擦的方法制備喉氣管狹窄模型，用藥組的用藥方式為棉球覆蓋傷口表面。從模型組中隨機選取一只家兔于術(shù)后第9、18天在纖維喉鏡下觀察，術(shù)后20天取各組兔喉氣管狹窄組織做測量，分析比較各組喉氣管狹窄度。
　　結(jié)果模型組和用

4、藥組與對照組相比均出現(xiàn)明顯喉氣管狹窄（ p<0.05），中、高濃度用藥組喉氣管狹窄度明顯低于模型組（p<0.05），低濃度用藥組與模型組無明顯差異（p>0.05），中、高濃度用藥組之間相比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；3個用藥組各自組內(nèi)對比無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　結(jié)論本實驗采用的兔喉氣管狹窄的建模方法穩(wěn)定有效，且操作簡便，適用于各種喉氣管狹窄的實驗研究。絲裂霉素C對預防和早期治療瘢痕性喉氣管狹窄具有重要作用。<

5、br>　　第二部分絲裂霉素C治療兔喉氣管狹窄機制研究
　　目的探討絲裂霉素C在兔成纖維細胞中的作用機制
　　方法取第一部分中模型組家兔喉氣管狹窄組織做兔成纖維細胞培養(yǎng)，分別置于0、2.5、12.5、50、100、200mg/L的絲裂霉素C中培養(yǎng)后用流式細胞儀檢測細胞凋亡差異，通過Western blot、熒光定量 PCR檢測細胞堿性成纖維細胞生長因子（bFGF）、轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGF-β1）在蛋白和mRNA轉(zhuǎn)錄水平表達變