雷公藤多苷抑制糖尿病腎病腎組織PI3K-Akt-mTOR信號通路活性而減輕腎小球肥大的作用和機制.pdf

1、背景及目的:本文分為二部分。在第一部分中，筆者綜述了哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin，mTOR)信號通路調(diào)控糖尿病腎病(diabetic nephropathy，DN)腎小球肥大的機制及中藥的干預作用。腎小球肥大(glomerular hypertrophy)是DN早期階段最主要的病理特征，其調(diào)控機制與mTOR信號通路活性密切相關(guān)。mTOR包括mTORC1和mTORC2，其中，mTORC

2、1上游信號通路是磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol-3-kinase，PI3K)/絲氨酸-蘇氨酸激酶(serine-threonine kinase，Akt)/5-單磷酸腺苷活性蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase，AMPK)，其代表性的下游信號分子是4E結(jié)合蛋白(4E-binding proteins，4EBP)和70kD核糖體S6激酶（ph

3、osphoprotein70 S6Kinase，p70S6K）。一些中藥提取物可以在體外通過干預PI3K/Akt/mTOR信號通路關(guān)鍵上、下游信號分子的表達而改善細胞增殖。對于腎小球系膜細胞和足細胞，mTOR通過調(diào)節(jié)細胞周期、能量代謝以及相關(guān)的基質(zhì)蛋白合成等多種途徑對腎小球固有細胞發(fā)揮著重要的調(diào)控作用。對于DN動物模型，mTOR抑制劑——雷帕霉素可抑制腎小球固有細胞肥大、增殖以及相應的腎小球基底膜增厚和系膜基質(zhì)沉積。一些中藥提取物在體內(nèi)

4、外可以通過干預DN腎組織或腎臟固有細胞mTOR信號通路的活性而減輕相應的腎小球病變。在第二部分中，作為本文的重點，筆者借助DN模型鼠，揭示雷公藤多苷(multi-glycoside of Tripterygium wilfordii Hook.f，GTW)在體內(nèi)改善DN腎小球肥大的作用和機制。
　　方法：大鼠隨機分為3組，即正常組5只、模型組5只、GTW組5只。采用單側(cè)腎切除聯(lián)合腹腔注射鏈脲佐菌素（streptozotocin，S

5、TZ）(35 mg·kg-1)建立DN模型。在DN模型建立后，分別經(jīng)灌胃給予模型組和GTW組大鼠蒸餾水(2mL)或GTW懸濁液(50mg·kg-1·d-1)，正常組大鼠亦給予蒸餾水(2mL)干預，每日1次，連續(xù)8周。給藥8周后，處死全部大鼠。在處死大鼠前后，分別收集尿液、血液及腎組織，進行相關(guān)檢測，觀察GTW對3組大鼠療效學指標、腎小球肥大指標以及PI3K/Akt/mTOR通路相關(guān)指標的影響。
　　結(jié)果：對于DN模型鼠，GTW能夠

6、改善尿白蛋白（urinary albumin，UAlb）、體重(body weight, BW)以及血清白蛋白(albumin，Alb)，但對其腎功能和肝酶無明顯影響;GTW能夠改善腎臟外形、重量、腎臟肥大指數(shù)(kidney hypertrophy index，KHI)以及腎小球形態(tài)、體積和腎小球細胞總數(shù)(glomerular cellular population，GCP); GTW能夠改善腎小球α-平滑肌肌動蛋白(α-smooth

7、muscle actin，α-SMA)熒光染色和腎組織兔抗大鼠增殖細胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)蛋白表達;GTW能夠減輕腎小球基底膜(glomerular basement membrane，GBM)增厚，但是，對其足突形態(tài)和腎組織nephrin蛋白表達無明顯影響;GTW能夠抑制腎組織p-Akt、p-mTOR、p-p70S6K和轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming g