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文檔簡介
1、目的:建立運動性心肌肥大大鼠模型,觀察運動性心肌肥大大鼠心肌組織IGF-1R、PI3K(p110α)、PI3K(p110γ)、Akt、mTOR等基因表達(dá),探討IGF-1/PI3K/Akt/mTOR這一信號通路在運動性心肌肥大形成中的作用和機制。為揭示運動性心肌肥大發(fā)生部分機制提供理論依據(jù)。
方法:①大鼠分組:清潔級雌性SD大鼠32只,體重180g-200g,隨機分成2組:安靜對照組(SC,n=16)和運動性心肌肥大模型組(SE
2、,n=16)。安靜對照組大鼠為正?;\內(nèi)飼養(yǎng),不進(jìn)行任何運動。②運動性心肌肥大動物模型的建立:運動訓(xùn)練方案參照Femandes和Oliveira等的運動訓(xùn)練方案進(jìn)行制定。在8周內(nèi),從周一至周五,SE組大鼠每天進(jìn)行一次游泳運動訓(xùn)練,每次持續(xù)60 min。運動訓(xùn)練時間為每天上午9:00-10:00進(jìn)行。游泳運動于四個150 cm×60cm×70 cm的游泳缸內(nèi)進(jìn)行,缸內(nèi)水深60cm,水溫控制在31±1℃。為避免大鼠間的相互干擾,每個游泳缸被平
3、均分為8個獨立的泳道,每個泳道內(nèi)放置1只大鼠。實驗運動采用強迫游泳運動法。訓(xùn)練過程中,大鼠的運動時間和負(fù)重逐漸增加,直至大鼠能夠在承載其體重5%的條件下完成60 min的游泳運動。其后,大鼠的運動持續(xù)時間和負(fù)重量一直保持至整個運動訓(xùn)練計劃完成。為排除外界環(huán)境因素對實驗結(jié)果的影響,每周將SC組大鼠置入水中兩次,每次持續(xù)時間為10 min。8周游泳運動結(jié)束后,取出大鼠心臟,計算心系數(shù)、左心系數(shù);HE染色光鏡下(×40)觀察心肌組織形態(tài)學(xué)的變
4、化;實時熒光定量PCR法測定大鼠心肌α-actin、ANP、α-MHC和β-MHC mRNA表達(dá),計算α/β-MHC,評價運動性心肌肥大模型建立是否成功。確定運動性心肌肥大大鼠模型建成后,運用實時熒光定量PCR法測定大鼠心肌IGF-1R、PI3K(p110α)、PI3K(p110γ)、Akt1、Akt2、Akt3、mTOR mRNA的表達(dá)量。
結(jié)果:⑴8周實驗后,兩組大鼠體重較實驗前均有增長,對照組大鼠體重極顯著高于運動組大鼠
5、(P<0.01);兩組大鼠血壓無顯著性差異(P>0.05);SE組大鼠與SC組大鼠相比,心系數(shù)顯著增加(P<0.05);左心室系數(shù)極顯著升高(P<0.01);心肌細(xì)胞直徑顯著增大(P<0.05);α-actin、ANP mRNA表達(dá)無顯著性差異,α/β-MHC無顯著差異(P>0.05)。說明運動性心肌肥大動物模型建立成功。⑵運動組與對照組相比,大鼠心肌PI3K(p110α)、Akt1、Akt2、mTOR mRNA表達(dá)水平顯著升高(P<0
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