PI3K-Akt-mTOR信號(hào)在運(yùn)動(dòng)性心肌肥大中的作用研究.pdf

1、目的：建立運(yùn)動(dòng)性心肌肥大大鼠模型，觀察運(yùn)動(dòng)性心肌肥大大鼠心肌組織IGF-1R、PI3K(p110α)、PI3K(p110γ)、Akt、mTOR等基因表達(dá)，探討IGF-1/PI3K/Akt/mTOR這一信號(hào)通路在運(yùn)動(dòng)性心肌肥大形成中的作用和機(jī)制。為揭示運(yùn)動(dòng)性心肌肥大發(fā)生部分機(jī)制提供理論依據(jù)。
　　方法：①大鼠分組:清潔級(jí)雌性SD大鼠32只，體重180g-200g，隨機(jī)分成2組:安靜對(duì)照組(SC，n=16)和運(yùn)動(dòng)性心肌肥大模型組(SE

2、，n=16)。安靜對(duì)照組大鼠為正?；\內(nèi)飼養(yǎng)，不進(jìn)行任何運(yùn)動(dòng)。②運(yùn)動(dòng)性心肌肥大動(dòng)物模型的建立:運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練方案參照Femandes和Oliveira等的運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練方案進(jìn)行制定。在8周內(nèi)，從周一至周五，SE組大鼠每天進(jìn)行一次游泳運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練，每次持續(xù)60 min。運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練時(shí)間為每天上午9:00-10:00進(jìn)行。游泳運(yùn)動(dòng)于四個(gè)150 cm×60cm×70 cm的游泳缸內(nèi)進(jìn)行，缸內(nèi)水深60cm，水溫控制在31±1℃。為避免大鼠間的相互干擾，每個(gè)游泳缸被平

3、均分為8個(gè)獨(dú)立的泳道，每個(gè)泳道內(nèi)放置1只大鼠。實(shí)驗(yàn)運(yùn)動(dòng)采用強(qiáng)迫游泳運(yùn)動(dòng)法。訓(xùn)練過程中，大鼠的運(yùn)動(dòng)時(shí)間和負(fù)重逐漸增加，直至大鼠能夠在承載其體重5％的條件下完成60 min的游泳運(yùn)動(dòng)。其后，大鼠的運(yùn)動(dòng)持續(xù)時(shí)間和負(fù)重量一直保持至整個(gè)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練計(jì)劃完成。為排除外界環(huán)境因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，每周將SC組大鼠置入水中兩次，每次持續(xù)時(shí)間為10 min。8周游泳運(yùn)動(dòng)結(jié)束后，取出大鼠心臟，計(jì)算心系數(shù)、左心系數(shù);HE染色光鏡下(×40)觀察心肌組織形態(tài)學(xué)的變

4、化;實(shí)時(shí)熒光定量PCR法測(cè)定大鼠心肌α-actin、ANP、α-MHC和β-MHC mRNA表達(dá)，計(jì)算α/β-MHC，評(píng)價(jià)運(yùn)動(dòng)性心肌肥大模型建立是否成功。確定運(yùn)動(dòng)性心肌肥大大鼠模型建成后，運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法測(cè)定大鼠心肌IGF-1R、PI3K(p110α)、PI3K(p110γ)、Akt1、Akt2、Akt3、mTOR mRNA的表達(dá)量。
　　結(jié)果：⑴8周實(shí)驗(yàn)后，兩組大鼠體重較實(shí)驗(yàn)前均有增長(zhǎng)，對(duì)照組大鼠體重極顯著高于運(yùn)動(dòng)組大鼠

5、(P＜0.01);兩組大鼠血壓無顯著性差異(P＞0.05);SE組大鼠與SC組大鼠相比，心系數(shù)顯著增加(P＜0.05);左心室系數(shù)極顯著升高(P＜0.01);心肌細(xì)胞直徑顯著增大(P＜0.05);α-actin、ANP mRNA表達(dá)無顯著性差異，α/β-MHC無顯著差異(P＞0.05)。說明運(yùn)動(dòng)性心肌肥大動(dòng)物模型建立成功。⑵運(yùn)動(dòng)組與對(duì)照組相比，大鼠心肌PI3K(p110α)、Akt1、Akt2、mTOR mRNA表達(dá)水平顯著升高(P＜0