白菜低溫要求型晚抽薹性的相關(guān)序列克隆與分析.pdf

1、大白菜(Brassic campesstris L ssp.pekinensis)屬于二年生蔬菜作物，需要經(jīng)歷一個(gè)低溫階段才能完成從營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)到生殖生長(zhǎng)的轉(zhuǎn)變而抽薹開花。而春季栽培溫度由低到高的變化和日照長(zhǎng)度的增加，極有利于大白菜的生殖生長(zhǎng)而導(dǎo)致未熟抽薹，給生產(chǎn)造成巨大的損失，而解決問題的根本途徑是培育和種植晚抽薹的大白菜品種。 為了闡明低溫要求型晚抽薹的分子機(jī)制，本研究利用易抽薹大白菜“BY”和晚抽薹蕪菁“M．M”雜交獲得的81

2、個(gè)DH系群體為試材，從中選擇了6個(gè)極早抽薹和6個(gè)極晚抽薹的株系分別組成早抽薹池和晚抽薹池。以兩池和雙親為樣本，以無低溫和3.5℃處理25天后獲得的mRNA為模板，反轉(zhuǎn)錄為cDNA，利用256對(duì)AFLP引物組合進(jìn)行cDNA-AFLP分析，篩選與白菜晚抽薹性相關(guān)的特異片段。獲得3條差異表達(dá)、且豐度較高的cDNA片段并進(jìn)行了克隆測(cè)序。序列測(cè)定和Blast分析表明，p65m47cDNA片段與C2結(jié)構(gòu)域蛋白基因有80﹪的同源性，期望值為7e<'-

3、17>，C2結(jié)構(gòu)域蛋白在細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中起著很重要的作用；p66m55cDNA I片段與擬南芥ATl G32530cDNA有85﹪的同源性，期望值為5 e<'-36>6，它編碼蛋白結(jié)合位點(diǎn)/泛素連接酶/鋅指結(jié)合蛋白；p66m55cDNA Ⅱ片段與擬南芥ATlG65590cDNA有87﹪的同源性，期望值為4e<'-37>，它編碼β-N-乙酰已糖胺水解酶。以上三個(gè)片段都是在無低溫時(shí)早抽薹和晚抽薹品系都有表達(dá)而低溫春化處理后通過春化作用的早抽