CD3+CD56+NKT-like細(xì)胞在原發(fā)性干燥綜合征外周血和唇腺組織的分布及作用機(jī)制.pdf

1、目的：研究CD3+CD56+NKT-like細(xì)胞在原發(fā)性干燥綜合征(primary Sjogren's syndrome，pSS)患者外周血、唇腺組織中的分布，探索NKT-like細(xì)胞在pSS中可能的作用機(jī)制。
　　方法：CD3+CD56+標(biāo)記NKT-like細(xì)胞，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)pSS患者及健康對(duì)照組外周血NKT-like細(xì)胞比例、其表面CX3CR1、CXCR5、FasL的表達(dá)，用CFSE染色檢測(cè)NKT-like細(xì)胞的增殖能力

2、，用AnnexinⅤ/7AAD標(biāo)記凋亡狀態(tài)，胞內(nèi)細(xì)胞因子刺激(ICCS)法觀察NKT-like細(xì)胞細(xì)胞因子的表達(dá)譜。分別用ELISA及CBA法測(cè)定血清CXCL13和CX3CL1含量。用體外趨化實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證重組人CX3CL1(rhCX3CL1)和重組人CXCL13(rhCXCL13)對(duì)NKT-like細(xì)胞的趨化作用。免疫熒光法探測(cè)CD3+CD56+NKT-like細(xì)胞在唇腺組織中的分布及CX3CR1在唇腺組織中的表達(dá)，用免疫組化法探測(cè)CX3C

3、L1在唇腺組織的表達(dá)。結(jié)合外周血流式染色、血清的結(jié)果以及臨床資料進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　結(jié)果：與健康對(duì)照組(HC)相比，pSS患者CD3+CD56+NKT-1ike細(xì)胞在外周血中顯著減少，且增殖能力及凋亡狀態(tài)無(wú)顯著差異。但在唇腺組織中表達(dá)增多，主要分布在腺泡周圍。pSS患者外周血CX3CL1、CXCR5水平升高，其中CX3CL1的水平與血清IgG水平正相關(guān)。pSS患者外周血CD3+CD56+NKT-like細(xì)胞表面很少表達(dá)CXCR5

4、，多表達(dá)CX3CR1，與HC均無(wú)顯著性差異。rhCX3CL1對(duì)CD3+CD56+NKT-like細(xì)胞有顯著的趨化作用，且隨著濃度的增加，趨化作用增強(qiáng)，而rhCXCL13則無(wú)顯著的趨化作用。pSS患者唇腺組織中腺泡上皮細(xì)胞高表達(dá)CX3CL1，而HC幾乎很少表達(dá);同時(shí)浸潤(rùn)唇腺組織的淋巴細(xì)胞多表達(dá)CX3CR1，包括腺泡周圍淋巴細(xì)胞。pSS患者外周血CD3+CD56+NKT-like細(xì)胞以分泌TNF-α和IFN-γ為主，很少分泌IL-4，幾乎不