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文檔簡介
1、目的:DNA甲基化異常在系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、系統(tǒng)性硬皮病(SSC)等自身免疫性疾病的發(fā)病中起著重要作用。Treg細胞能介導機體自身免疫耐受,在自身免疫性疾病的發(fā)生中起保護作用。轉錄因子FOXP3對Treg的增殖分化及正常功能的維持起關鍵作用。有研究表明FOXP3在自身免疫性疾病中表達異常且與DNA甲基化異常相關。本課題主要通過研究原發(fā)性干燥綜合征(primary Sj(o)grensyndrome,pSS)患者外周血CD4+T細胞
2、中FOXP3基因的表達水平及其甲基化狀態(tài),從而探討表觀遺傳學在pSS發(fā)病中的作用。
方法:取pSS患者、正常人外周血,用密度梯度離心法分離得到單個核細胞,進一步用磁珠法分選得到CD4+T細胞。分別采用實時定量聚合酶鏈反應(real-time RT-PCR)和Western blot檢測CD4+T細胞中FOXP3的mRNA和蛋白表達水平,亞硫酸氫鈉測序法檢測FOXP3基因啟動子區(qū)域的甲基化狀態(tài)。
結果:與健康對照相比,
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