擬南芥PPR蛋白AtECB2的功能研究.pdf

1、AtECB2蛋白是一個已報道的定位于葉綠體的蛋白，它屬于PPR蛋白家族中的DYW亞群。以前的實驗證明該蛋白參與到accD和ndhF的RNA編輯過程，即這兩個基因的在RNA轉錄中發(fā)生了特異性的胞嘧啶(Cytidine)到尿嘧啶(uridine)的轉變。在本論文中，我們制備了針對該蛋白的特異性的多克隆抗體，通過RNA免疫共沉淀實驗(RIP)實驗證明該蛋白質直接結合在其所參與的三個編輯位點上下游約200b的位置上；并且將含有PPRmotif的

2、一段蛋白質體外誘導表達成功。RARE1據(jù)報道參與到accDRNA編輯的一個PPR蛋白質。酵母雙雜交實驗證明RARE與AtECB2蛋白質的一段DYW結構域在酵母體內并沒有相互作用。同時，我們分析了atecb2-2突變體。在早期發(fā)育過程中，該突變體的真葉呈現(xiàn)一個由黃轉綠的表型，透射電鏡結果顯示該突變體早期真葉葉綠體發(fā)育有缺陷，隨著真葉轉綠，葉綠體發(fā)育逐漸正常。Northernbolt實驗證實在這個轉綠的過程中，rbcL的活性可以恢復到野生型