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1、PPR蛋白含有35個(gè)氨基酸串聯(lián)排列(2-30重復(fù)序列),這些重復(fù)序列稱為PPR重復(fù)單元并且可以通過(guò)氨基酸序列特異地結(jié)合單鏈RNA,參與RNA加工、編輯、剪切等。在人類中,PPR蛋白在包括導(dǎo)致Leigh綜合癥在內(nèi)的眾多生理和病理過(guò)程中發(fā)揮重要作用。在植物中,大多數(shù)PPR蛋白對(duì)葉綠體的加工或翻譯有重要作用,進(jìn)一步研究還發(fā)現(xiàn)PPR蛋白參與了RNA的編輯。粟酒裂殖酵母中最近初步解析了之前報(bào)道的9個(gè)PPR蛋白的部分功能,它們都參與線粒體RNA的表
2、達(dá)及調(diào)控。Ppr10作為一個(gè)新鑒定的PPR蛋白它的功能至今尚不清楚。本文研究發(fā)現(xiàn)缺失ppr10的菌株在穩(wěn)定期后期出現(xiàn)大量死亡;Ppr10不影響線粒體編碼RNAs的加工及穩(wěn)定;通過(guò)RNA免疫共沉淀發(fā)現(xiàn)Ppr10可以結(jié)合線粒體編碼的mRNA。
本文通過(guò)串聯(lián)親和純化(TAP)技術(shù)純化Ppr10蛋白復(fù)合體時(shí)得到一個(gè)與其相互作用的蛋白,將其命名為Mpa1。經(jīng)免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)證明在粟酒裂殖酵母體內(nèi)它們之間確實(shí)存在相互作用,并且這種相互作用并
3、不借助于RNA的參與;進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)Mpa1的其中一個(gè)功能是維持Ppr10在酵母體內(nèi)的穩(wěn)定性,當(dāng)缺失Mpa1時(shí)Ppr10在酵母體內(nèi)的蛋白含量明顯減少,但是ppr10 mRNA水平?jīng)]有明顯的變化,最終發(fā)現(xiàn)Ppr10蛋白含量的減少是被線粒體基質(zhì)蛋白酶Lon1所降解。Mpa1在酵母體內(nèi)的含量則不受Ppr10的影響。粟酒裂殖酵母中存在線粒體翻譯起始因子Mti2和Mti3,經(jīng)免疫共沉淀證明Ppr10與Mti2存在相互作用。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示Ppr1
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