粟酒裂殖酵母線粒體蛋白Mpa1的相關功能研究.pdf

1、線粒體可以進行氧化磷酸化和三磷酸腺苷(ATP)的合成，被稱為細胞內的發(fā)動機，是真核生物中一種十分重要的細胞器。線粒體既是機體能量代謝的中心，又參與了多種細胞的病理過程。線粒體中的蛋白表達異常是引起線粒體功能產生障礙的重要因素。而裂殖酵母在進化上與人類更為接近，又加上它增殖周期短、培養(yǎng)和操作較簡單，所以是對線粒體功能進行研究時常用的一種模式生物。線粒體里有很多蛋白，它們對線粒體功能的發(fā)揮有著非常重要的影響。Mpa1是我們實驗室近期發(fā)現(xiàn)的一

2、個線粒體蛋白，它是被Ppr10通過串聯(lián)親和純化免疫沉淀反應共沉淀下來的一個蛋白，并且已經被我們實驗室證實與Ppr10存在相互作用。本文將進一步探究線粒體蛋白Mpa1的功能。
　　我們實驗室已經通過研究發(fā)現(xiàn)，Mpa1的缺失會影響Ppr10蛋白的穩(wěn)定存在。在本文研究中，我們首先通過構建抗性標簽質粒，構建了△lon1、△mpa1和△mpa1△lon1突變體。通過對△mpa1△lon1突變體中Ppr10蛋白水平的檢測，發(fā)現(xiàn)敲除lon1后，

3、Ppr10蛋白能夠穩(wěn)定存在，這說明Ppr10蛋白的減少就是被Lon1降解的。然后通過點圈實驗檢測線粒體的呼吸鏈功能，結果表明lon1基因的敲除雖然使得Ppr10蛋白不再被降解，但是線粒體的功能并沒有得到修復。接著通過蛋白質免疫印記分析實驗檢測了線粒體編碼的蛋白水平，結果表明lon1基因的敲除雖然使得Ppr10蛋白不再被降解，卻不能修復降低了的線粒體編碼的蛋白水平。這說明，△mpa1突變體所表現(xiàn)出來的線粒體功能障礙，不是由于Ppr10蛋白